[发明专利]全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法在审
| 申请号： | 201410793186.0 | 申请日： | 2014-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN104531793A | 公开（公告）日： | 2015-04-22 |
| 发明（设计）人： | 郁庆明 | 申请（专利权）人： | 郁庆明 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 江阴市同盛专利事务所(普通合伙) 32210 | 代理人： | 唐纫兰;隋玲玲 |
| 地址： | 214434 江苏省无锡*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞 生物转化 制备 氨基 丁酸 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述方法是：
将苏氨酸脱氨酶和亮氨酸脱氢酶串联表达，克隆氯霉素抗性的表达载体上，实现二个酶在同一细菌中共表达；
甲酸酶克隆到卡拉霉素抗性pET-28a载体上进行表达，和大肠杆菌中辅酶I代谢途径中限速步骤的pcnB基因串联表达，实现二个酶的高表达；
将二种抗性的表达载体，转化到同一个细菌里进行共表达，实现了四个酶，在同一属主菌里的表达；
用大肠杆菌发酵表达含有四种酶的大肠杆菌用全细胞，实现从苏氨酸到L-2-氨基丁酸的生物还原转化。
2.根据权利要求1所述的一种全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法，其特征在于，苏氨酸脱氨酶和亮氨酸脱氢酶串联表达的表达载体选用T7启动子。
3.根据权利要求1所述的一种全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法，其特征在于，甲酸酶采用中等拷贝的表达载体pET-28a实现甲酸酶的高效表达。
4.根据权利要求1或2所述的一种全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法，其特征在于，苏氨酸脱氨酶和亮氨酸脱氢酶用低拷贝的表达载体在同一细菌里进行表达。
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