[发明专利]一种防治甘蔗黑穗病的生防菌株ZHR0及其应用

说明书

技术领域

本发明属于植物保护技术领域，具体涉及一种防治甘蔗黑穗病的生防菌株ZHR0及其应用。

背景技术

甘蔗黑穗病(sugarcane smut)是由甘蔗鞭黑粉菌(Ustiliago scitaminea Sydow)引起的一种真菌性病害，1877年在南非纳塔尔首先报道，该病现已成为重要的世界流行病害。染病的种蔗导致萌芽早，分蘖增多，叶片狭窄，淡绿色，蔗茎细小。甘蔗黑穗病典型的症状是在病蔗梢部产生一个长而不分枝的黑色鞭状物(称为黑穗鞭)，长短不一，短的直或稍弯曲，长的向下卷曲。黑穗鞭中心为一条由薄壁组织或维管束组织构成的心柱，心柱外面附着一层黑色的冬孢子，冬孢子成熟后，薄膜破裂，大量黑色粉状的冬孢子随气流飘散。

黑穗病直接降低蔗茎产量，同时降低蔗糖分，严重影响品质，因此甘蔗黑穗病被称为甘蔗的“癌症”。目前，中国甘蔗主栽品种普遍感染黑穗病，田间发病率超过10％，有的田块甚至超过50％，经济损失严重，严重制约了甘蔗产业的发展。

甘蔗黑穗病菌属真菌中的担子菌亚门黑粉菌属甘蔗鞭黑粉菌，Ustiliago scitaminea Sydow病菌从甘蔗的芽或幼芽的幼嫩分生组织侵入，是一种典型的茎寄生病害，属于系统性寄生病害。虽然对甘蔗黑穗病的认识较早，但对病害的防治一直没有稳定而有效的措施。传统的防治方法如改善栽培措施、蔗种消毒、 化学防治、选用抗病品种等。传统育种法很难筛选到高抗基因，而且难以克服抗病性和产量质量性状之矛盾；系统性病害用化学药物难以控制，而且化学防治中病菌易产生抗药性，造成环境污染。因此许多病害尤其是一些土传病害、系统性病害的生物防治和拮抗菌的利用引起了国内外的高度重视。

发明内容

本发明的目的是提供一种防治甘蔗黑穗病的生防菌株ZHR0，对甘蔗产业危害较大的黑穗病进行生物防治。

为了实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种菌株，所述菌株为Bacillus amyloliquefaciens(解淀粉芽孢杆菌ZHR0)ZHR0菌株，并且所述Bacillus amyloliquefaciens ZHR0(解淀粉芽孢杆菌ZHR0)菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2014577。

保藏单位地址：中国.武汉.武汉大学；保藏日期：2014年11月24日。

所述Bacillus amyloliquefaciens ZHR0(解淀粉芽孢杆菌ZHR0)菌株在防治甘蔗黑穗病的应用。

所述Bacillus amyloliquefaciens ZHR0(解淀粉芽孢杆菌ZHR0)菌株的筛选方法，包括以下步骤：

(1)取数株甘蔗叶片放入灭菌塑料袋中迅速带回实验室，取5～20g甘蔗叶片经过消毒灭菌处理后剪碎放入灭菌的三角瓶中，加50～200ml无菌水，灭菌玻璃珠5～20g，于摇床上150-180rpm振荡20～45min后，静置5～15min；

(2)吸取上清液稀释至10^-4、10^-5、10^-6三个梯度，从三个梯度稀释液中各吸取0.05～0.2mL液体分别接种在LB固体培养基上，28～32℃恒温培养三天，每个梯度重复三次，根据培养基上菌落大小和形态分离纯化并保存菌种。

一种ZHR0生防菌剂的制备方法，将所述Bacillus amyloliquefaciens ZHR0(解淀粉芽孢杆菌ZHR0)菌株接种在LB液体培养基上，100～300rpm振荡培养12-16h，用灭菌水稀释至活菌总浓度为1×10⁹-1×10¹⁰CFU/ml，得到ZHR0生防菌剂。

与现有技术相比较，本发明具有如下有益效果：

本发明得到一种Bacillus amyloliquefaciens ZHR0(解淀粉芽孢杆菌ZHR0)菌株，并通过对峙培养试验和温室桶栽实验证明所述Bacillus amyloliquefaciens ZHR0(解淀粉芽孢杆菌ZHR0)菌株具有较好的防治甘蔗黑穗病的效果，防效可达50％以上。

具体实施方式

实施例1

所述Bacillus amyloliquefaciens ZHR0(解淀粉芽孢杆菌ZHR0)菌株是2013年9月份在甘蔗叶片中分离得到的一株解淀粉芽孢杆菌。