[发明专利]一株高效固氮芽孢杆菌及含其微生物肥料的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种新的固氮芽孢杆菌[J-25(1)]及含有该菌株生产微生物肥料的制备方法。

背景技术

我国是一个农业大国，肥料在我国粮食生产中占有非常重要的地位。但是由于长期对化肥的过量和不合理施用，也带来一些不容忽视的问题：1、污染水源：大量使用化肥和水土流失，氮磷营养物可随地表径流进入地面水体中或下渗，通过土壤进行横向运动，然后排入下水或地表水体中，使地表水富营养化，或直接污染地下水。2、土壤变板结：由于大量施用化肥，忽视有机肥的施用，土壤肥力出现某些衰退，有机质匮乏。透气性降低，需氧微生物活性下降，土壤熟化慢、造成土壤板结、作物根系生长发育不良，影响作物生长。3、盐渍化加重：过量施用化肥后，土壤中盐离子增多，pH值升高。使土壤盐渍化加重，防碍根系正常吸水，影响植株生长。4、微量元素缺乏：多年连作的蔬菜等，吸收土壤中的锌、硼、钼、铜、锰等微量元素，又没有补充施用微肥，致使土壤中微量元素日渐减少，因此严重缺少微量元素，影响蔬菜等作物的生长发育。5、活土层变浅：大棚和露地蔬菜多实行茬茬交叉间套作，人工耕作，活土层变浅。6、病虫害积累：连作使病菌虫害在土壤中积累增多，危害加重，根系因而受害腐烂，甚至全株枯死。由于病虫害严重、农药使用量增加，造成蔬菜污染。降低花费的用量，是传统农业向生态农业转化重要目标。

微生物肥料是一种环境友好型肥料，也是未来农林业可持续发展的重要方向之一，它可维持和提高土壤肥力，有利于微生物优势种的繁殖，保持生态平衡，节能减排，且使用方便等优点。因此，微生物肥料越来越受人类青睐。近年来我国微生物肥料发展很快，品种不断增加。因菌种、固氮能力、生产技术和配方等原因，目前市场的微生物肥料产品质量参差不齐。微生物肥料中固氮菌种类、固氮能力、有效活菌数和杂菌量都是产品质量的重要指标。其中菌种种类和数量是决定微生物肥料肥效的核心问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型、高效固氮微生物，并将所述固氮微生物吸附于有机载体上，形成有机微生物肥料。固氮微生物在土壤中温度和湿度适宜的条件下，可大量繁殖，自行固定空气中的分子态氮，为植物提供氮源。因在植物生长过程中不再施用化学氮肥，不仅节约了能源，减少了合成氨过程中的三废排放，还避免了过量施肥对环境环境和水源的污染。同时，有机微生物肥料还可促进作物生长，减少土传病害发生，提高农产品品质和质量。

本发明的目的之一，是提供一株新型、高效固氮的芽孢杆菌[J-25(1)]。

本发明的目的之二，是提供一种适合该高效固氮芽孢杆菌[J-25(1)]生长培养基的配方。

本发明的目的之三，是提供一种由该新型、高效固氮的芽孢杆菌[J-25(1)]菌种制备而成的微生物肥料及其制备方法。

本发明的目的之一可以通过采取如下技术方案达到：

一株新的高效固氮芽孢杆菌(acillus amyloliquefaciens)，具体的，该菌种被命名为“J-25(1)”，该菌种从山东省泰安市岱岳区房村镇的蔬菜大棚连续种植番茄10年以上的土壤中分离，并经驯化，长期保存、转接其性状稳定。

该新型、高效固氮芽孢杆菌[J-25(1)]已于2014年7月25日通过上海生工生物工程有限公司通过16S DNA测序，证明该高效固氮芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌，生物学命名Bacillus amyloliquefaciens，所得序列见序列表，测序单位地址：上海市松江区香闽路698号，生工生物工程(上海)股份有限公司。

该新型、高效固氮芽孢杆菌[J-25(1)]的生物学特性为白色，半透明，光滑湿润菌落，稍隆起，圆形齐整菌落；革兰氏染色菌体紫色，为革兰氏阳性菌，杆状；为生芽孢需氧菌，可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。生长温度25-55℃，最佳生长温度37℃，最适PH6.8-7.8。在不良条件下，菌体转化产生芽孢，芽孢对不良环境抗逆性强，可短时间耐受100℃高温。

本发明还要求保护一种适合该解淀粉芽孢杆菌(高效固氮芽孢杆菌[J-25(1)])生长的培养基及其制备方法。具体如下：

本发明中所使用到的培养基有：

1号固体培养基：蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，氯化钠10g/L，琼脂18-20g/L，PH调至7.2。

1号液体培养基：该培养基不含琼脂，其他成分和含量与1号培养基相同，PH调至7.2。

2号固体培养基：牛肉膏3g/L，蛋白胨5g/L，葡萄糖2.5g/L，NaCl5g/L，琼脂18-20g/L，用NaOH调pH至7.2。