[发明专利]5-氟尿嘧啶衍生物、5-氟尿嘧啶免疫原及其抗体与5-氟尿嘧啶检测试剂盒

权利要求书

1.一种5-氟尿嘧啶衍生物，其特征在于，具有式(Ⅰ)所示的结构式：

其中，R为-(CH₂)n-COO-，n为1至20之间的整数。

2.一种5-氟尿嘧啶免疫原，其特征在于，具有式(Ⅱ)所示的结构式：

其中，R为连接基团-(CH₂)n-COO-，n是1至20之间的整数，载体为具有免疫原性的蛋白质或多肽；优选所述载体为血清蛋白、血蓝蛋白或甲状腺球蛋白中的任意一种。

3.一种5-氟尿嘧啶免疫原的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

制备权利要求1所述的5-氟尿嘧啶衍生物：以及

将所述5-氟尿嘧啶衍生物与载体进行连接，得到所述5-氟尿嘧啶免疫原；

其中，所述载体为具有免疫原性的蛋白质或多肽。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述5-氟尿嘧啶衍生物由5-氟尿嘧啶和Br-(CH₂)n-COOH在碱性条件下经取代反应制备而成；优选地，当n＝1时，所述5-氟尿嘧啶衍生物的制备步骤如下：

5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，所述5-氟尿嘧啶衍生物与所述载体连接的步骤包括：

步骤S1，制备载体溶液和5-氟尿嘧啶衍生物溶液；优选所述载体为血清蛋白、血蓝蛋白或甲状腺球蛋白中的任意一种；

步骤S2，将所述5-氟尿嘧啶衍生物溶液滴加至所述载体溶液中，得到5-氟尿嘧啶免疫原粗品；

步骤S3，对所述免疫原粗品进行纯化，得到所述5-氟尿嘧啶免疫原；优选所述纯化采用透析的方式进行。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1包括：

步骤S11，将所述载体溶解于0.15～0.25M，pH 8.2～8.7的磷酸钠缓冲液中，得到所述载体溶液；其中，所述载体与所述磷酸缓冲液的质量体积比为3:1～5:1，优选为4:1；

步骤S12，将所述5-氟尿嘧啶衍生物与8～12mM，pH 4.8～5.3的磷酸钾缓冲液和有机溶剂混合，得到混合物；其中，所述有机溶剂包括二甲基甲酰胺、乙醇、1-乙基-3-(-3-二甲氨丙基)碳二亚胺和N-羟基硫代琥珀酰亚胺；

优选所述5-氟尿嘧啶衍生物与所述1-乙基-3-(-3-二甲氨丙基)碳二亚胺和N-羟基硫代琥珀酰亚胺的质量比为1：0.8～1.1：0.20～0.30；所述二甲基甲酰胺与所述乙醇和所述磷酸钾缓冲液的体积比为1：0.8～1.1：1.8～2.2；更优选所述5-氟尿嘧啶衍生物与所述二甲基甲酰胺、所述乙醇和所述磷酸钾缓冲液的总体积的质量体积比为95～105：6～8；

步骤S13，对所述混合物在室温下进行搅拌20～40min，得到所述5-氟尿嘧啶衍生物溶液。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中包括：

步骤S21，将所述5-氟尿嘧啶衍生物溶液滴加至所述载体溶液中，得到混合溶液；

步骤S22，对所述混合溶液进行低温搅拌，得到所述免疫原粗品；

其中，所述5-氟尿嘧啶衍生物与所述载体的质量比为0.8～1.1：0.8～1.1；所述低温搅拌的温度为2～8℃，所述低温搅拌的时间大于等于24h。

8.一种抗5-氟尿嘧啶抗体，所述抗5-氟尿嘧啶抗体由免疫原免疫动物后得到，其特征在于，所述免疫原为权利要求2所述的5-氟尿嘧啶免疫原。

9.根据权利要求8所述的抗体，其特征在于，所述抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。

10.根据权利要求8所述的抗体，其特征在于，所述抗体为完整的蛋白或者能够与所述免疫原特异性结合的多肽片段。

11.根据权利要求8所述的抗体，其特征在于，所述免疫原免疫的所述动物包括兔、山羊、小鼠、绵羊、豚鼠或马中任意一种。

12.一种5-氟尿嘧啶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的5-氟尿嘧啶衍生物和/或权利要求8至11中任一项所述的抗5-氟尿嘧啶抗体。