[发明专利]花生四烯酸的制备方法

权利要求书

1.花生四烯酸的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)通过摇瓶实验对高山被孢霉产ARA的培养条件进行优化，所述优化的方法为取4mL种子液接入装有50mL基础培养基的250mL三角瓶，28℃、150rpm培养5～6d，得到优化培养基：葡萄糖60g/L；酵母粉或玉米浆10g/L；谷氨酸1.0g/L；MgSO₄-7H₂O0.1g/L；KH₂PO₄2.0g/L；CaCO₃0.05g/L；ZnSO₄-7H₂O 0.1g/L；混合微量元素1mL/L；混合维生素1mL/L；pH调至6.0；所述基础培养基的组成为葡萄糖40g/L；酵母粉5g/L；MgSO₄-7H₂O 0.1g/L；KH₂PO₄0.5g/L；CaCO₃0.05g/L；ZnSO₄-7H₂O 0.1g/L；pH 6.0；

2)对高山被孢霉在优化培养基中分别以酵母粉和玉米浆为氮源进行了2L分批发酵，再以酵母粉为氮源进行的发酵罐放大实验，菌体生长正常，未发生自溶现象，并获得干菌体、油脂和ARA。

2.如权利要求1所述花生四烯酸的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述混合微量元素包括FeCl₃·6H₂O,、H₃BO₃、MnCl₂·4H₂O、CoCl₂·6H₂O、CuSO₄·5H₂O、NiSO₄·6H₂O。

3.如权利要求1所述花生四烯酸的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述混合维生素包括维生素B₁₂、生物素、维生素B₁、泛酸钙。

4.如权利要求1所述花生四烯酸的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述发酵的条件为：将培养3d的液体种子，按10％接种量接种于基础培养基中，装液量1.5L，初始葡萄糖浓度为60g/L，在28℃，搅拌转速200rpm，通气量1vvm。