[发明专利]一种紫甘薯脱毒组培快繁的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物脱毒组培快繁技术，尤其涉及一种紫甘薯脱毒组培快繁的方法。

背景技术

紫甘薯又称黑薯，薯肉呈紫至深紫色，其皮、肉都可食用，味道略甜，有较高的食用和药用价值，是一种纯天然的保健食品。紫甘薯除具有普通甘薯的营养成分外，还富含硒元素和花青素。医学研究表明，花青素对100多种疾病有预防和治疗作用，被誉为第七大营养元素。紫甘薯在国际、国内市场十分走俏，发展前景极为广阔。

目前，紫甘薯种植主要是大田直播和育苗移栽，大田直播由于出苗率低、种苗品质差的问题，已经不能满足现代化农业的需求；育苗移栽是紫甘薯种子阴干后，采用地窖式保温保暖技术贮藏，次年开春后进行温床育苗。该方法相较于大田直播，明显提高了出苗率。但由于种薯已感染，感染后种薯品质下降，其营养成分含量降低，不能符合消费者的需求。

发明内容

本发明目的是克服以上存在不足，提出一种无需切取微小植物茎尖，即能大量快繁紫甘薯脱毒组培苗的方法。

本发明目的通过以下技术方案来实现：

一种紫甘薯脱毒组培快繁的方法，按如下步骤进行：

1)培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：

①基本培养基：选用MS培养基，蔗糖或白糖30～40g/L，琼脂15～20g/L，pH6.6～7.8；

②诱导培养基：MS中添加6-BA0.3～1.2mg/L和NAA0.25～0.4mg/L；

③愈伤组织分化培养基：MS中添加6-BA3.5～5.0mg/L和NAA0.1～0.3mg/L；

④增殖培养基：MS中添加6-BAl.0mg/L和NAAO.5mg/L；

⑤生根培养基：1/2MS中添加NAAO.1mg/L和赤霉素0.01～0.02mg/L；

2)外植体的选取与灭菌：取紫甘薯的种子，经灭菌处理，作为脱毒组培用的外植体；

3)诱导培养：将步骤2)灭菌处理后的种子接种在诱导培养基上，直接形成无根组培苗或先形成愈伤组织，再将愈伤组织移植至分化培养基诱导出丛芽，形成无根组培苗、珠芽和小块根；

4)增殖培养：将步骤3)直接形成的无根组培苗或先形成愈伤组织，再经分化培养基诱导形成的无根组培苗、珠芽和小块根接种在增殖培养基上，诱导出丛芽，形成无根组培苗、珠芽和小块根；

5)生根培养：将步骤4)增殖形成的无根组培苗、珠芽和小块根接种在生根培养基中进行生根培养；

6)移栽：当步骤5)的生根组培苗生长至3～5cm以上、生根珠芽0.2～0.5cm以上，生根小块根直径0.5～1.0cm以上，移栽基质培养至成苗。

进一步，所述的灭菌处理是经30％的高锰酸钾溶液和75％酒精分别浸泡0.5～1.0min，再用0.1％升汞溶液灭菌20～30min，最后用无菌水冲洗3～5次。

与现有紫甘薯育苗技术相比，本发明的有益效果是：

1、本发明脱毒简便、快捷，解决了茎尖脱毒不彻底的问题，将脱毒组培苗、脱毒珠芽和脱毒小块根经病毒检测后，带毒率均为0，可解决病毒引起紫甘薯种质退化问题，恢复其产量和品质。

2、紫甘薯种子留种容易，可快速获得大量脱毒组培苗、脱毒珠芽和脱毒小块根，月繁殖系数达5～10倍，适合工厂化育苗，可商品化生产。

3、本发明为紫甘薯育苗提出了一种全新的方法，利于扩大生产。

具体实施方式

通过以下实施例对本发明作进一步的详细说明，但本发明的内容并不局限于此。

实施例1

一种紫甘薯脱毒组培快繁的方法，按如下步骤进行：

1)培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：

①基本培养基：选用MS培养基，蔗糖或白糖30～40g/L，琼脂15～20g/L，pH6.6～7.8；

②诱导培养基：MS中添加6-BA0.3～1.2mg/L和NAA0.25～0.4mg/L；

③愈伤组织分化培养基：MS中添加6-BA3.5～5.0mg/L和NAA0.1～0.3mg/L；

④增殖培养基：MS中添加6-BAl.0mg/L和NAAO.5mg/L；

⑤生根培养基：1/2MS中添加NAAO.1mg/L和赤霉素0.01～0.02mg/L；

2)外植体的选取与灭菌：取紫甘薯的种子，先用30％的高锰酸钾溶液和75％酒精浸泡0.5～1.0min，再用0.1％升汞溶液灭菌20～30min，最后用无菌水冲洗3～5次后，作为脱毒组培用的外植体；