[发明专利]一株能够高产脂的卷枝毛霉及应用在审
申请号: | 201410802019.8 | 申请日: | 2014-12-18 |
公开(公告)号: | CN104946539A | 公开(公告)日: | 2015-09-30 |
发明(设计)人: | 宋元达;唐鑫;张怀渊 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P7/64;C12R1/785 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 能够 高产 毛霉 应用 | ||
1.一株卷枝毛霉(Mucor circinelloides)WJ11,该菌株已于2014年9月17日在中国典型培养物保藏中心保藏,其保藏号为CCTCC NO:M2014424。
2.根据权利要求1所述的卷枝毛霉WJ11生产油脂的发酵培养方法,其特征在于该方法的步骤如下:
A、菌种活化
将卷枝毛霉WJ11孢子液按与活化培养基的体积比1∶1000~2000接入装有活化培养基的带挡板三角瓶中,在摇床中温度25~35℃与转速100~200rpm的条件下恒温培养16~30h,得到一种活化菌种液;
B、种子培养
将步骤A得到的活化菌种液按种子培养基体积的5~15%接入装有种子培养基的带挡板三角瓶中,在摇床中温度25~35℃与转速100~200rpm的条件下恒温培养16~30h,得到一种种子培养液;
C、发酵培养
在无菌的条件下,将步骤B得到的种子培养液按体积为发酵培养基体积的5~15%接入装有发酵培养基的发酵罐中,在通气流量1~3L/min、pH为5.0~7.0、温度25~35℃与转速500~1000rpm的条件下恒温培养80~120h,得到一种发酵培养液;
D、冷冻干燥
将步骤C得到的发酵培养液经过滤,然后在冷冻干燥机中冻干至恒重,得到含有油脂的卷枝毛霉WJ11的干菌体;
E、脂肪酸提取
将步骤D得到的干菌体研磨,采用氯仿甲醇法提取油脂。
3.根据权利要求2所述的发酵培养方法,其特征在于所述的活化培养基与种子培养基组成如下:30g/L萄萄糖、3.3g/L酒石酸铵、7.0g/L KH2PO4、2.0g/L Na2HPO4、1.5g/L MgSO4·7H2O、1.5g/L酵母粉、0.1g/L CaCl 2·2H2O、0.008g/L FeCl3·6H2O、0.001g/L ZnSO4·7H2O、0.0001g/L CuSO4·5H2O、0.0001g/L Co(NO3)2·6H2O与0.0001g/L MnSO4·5H2O。
4.根据权利要求2所述的发酵培养方法,其特征在于所述的发酵培养基组成如下:50~120g/L葡萄糖、0.1~5g/L酒石酸铵、5~10g/L KH2PO4、1~5g/L Na2HPO4、1~5g/L MgSO4·7H2O、0~2g/L酵母粉、0.1g/L CaCl2·2H2O、0.008g/L FeCl3·6H2O、0.001g/L ZnSO4·7H2O、0.0001g/L CuSO4·5H2O、0.0001g/L Co(NO3)2·6H2O与0.0001g/L MnSO4·5H2O。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于所述的卷枝毛霉WJ11发酵菌体生物量达12~20g/L。
6.根据权利要求2或5所述的方法,其特征在于所述的卷枝毛霉WJ11菌体含有以该菌体总重量计30~40%脂肪酸。
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