[发明专利]一种血液乙肝、丙肝和梅毒快检离心式芯片及检测方法有效

专利信息
申请号: 201410803033.X 申请日: 2015-08-04
公开(公告)号: CN104502594A 公开(公告)日: 2015-07-29
发明(设计)人: 郭嘉;戴彰;周勇亮;张忠英 申请(专利权)人: 厦门大学
主分类号: G01N33/576 分类号: G01N33/576;G01N33/569;B01L3/00
代理公司: 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 代理人: 张松亭
地址: 361000 *** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 血液 乙肝 丙肝 梅毒 离心 芯片 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种用于血液乙肝、丙肝和梅毒快速检测的微流控芯片,其特征在于:主体为光盘形状,每个主体上面均匀分布至少四个微流控单元模块;每个微流控单元模块包括:用于装缓冲液的第一洗液池(1)和第二洗液池(2)、用于样品反应的反应池(3)、用于装酶标试剂的酶液池(5)、分别用于装ELISA反应的A、B液的两个检测液池(6),用于装终止液的一个终止液池(7),以及一个废液池(8),其中:

废液池(8)设于光盘的近边缘处,反应池(3)和废液池(8)之间设有第三通道(3-1),第三通道(3-1)上设有阀门(4);第一洗液池(1)、第二洗液池(2)、酶液池(5)、检测液储存池(6)和(7)分别位于反应池(3)靠近光盘圆心的一侧,并分别通过一通道和反应池(3)连接,其中第二洗液池(2)和反应池(3)之间设第二通道(2-1),第一洗液池(1)和反应池(3)之间设第一通道(1-1),酶液池(5)和反应池(3)之间设第五通道(5-1),终止液池(7)和反应池(3)之间设第七通道(7-1),检测液池(6)和反应池(3)之间设第六通道(6-1),其中;

使液体通过第二通道(2-1)的第二离心力,第五通道(5-1)的第五离心力,第一通道(1-1)的第一离心力,第六通道(6-1)的第六离心力,第七通道(7-1)的第七离心力依次增高,每一级离心力对应增加200-3000rpm;液体通过第三通道(3-1)的第三离心力小于第二通道(2-1)的第二离心力。

2.如权利要求1所述的一种用于血液乙肝、丙肝和梅毒快速检测的微流控芯片,其特征在于:通道的设计为:第二离心力对应400-600rpm,第五离心力对应800-1200rpm,第一离心力对应1600-2000rpm,第六离心力对应2400-3000rpm,第七离心力对应4000-6000rpm。

3.如权利要求2所述的一种用于血液乙肝、丙肝和梅毒快速检测的微流控芯片,其特征在于:第三离心力对应100-250rpm。

4.如权利要求1所述的一种用于血液乙肝、丙肝和梅毒快速检测的微流控芯片,其特征在于:其中,第二通道(2-1)的孔径为500μm,第一通道(1-1)的孔径为200μm,第五通道(5-1)的孔径为300μm,第七通道(7-1)的孔径为50μm,第六通道(6-1)孔径为100μm。

5.一种血液中乙肝、丙肝和梅毒快速检测方法,包括如下步骤:

1)制作权利要求1所述血液快速检测的微流控芯片,并且将分别包被了乙肝、丙肝和梅毒抗体的微珠及相应的试剂分别封装进芯片的不同微流控单元模块中;该微流控芯片设有四个微流控单元模块,其中三个分别用于检测乙肝、丙肝和梅毒,另一个用于空白对照;

2)将制作好的芯片置于离心力驱动装置中;

3)通过每个微流控单元模块的反应池的进液口注入血液,血液进入反应池后,充分孵化;

4)启动离心力驱动装置,以第三离心力的离心速度离心,使反应池(3)中的血液流入废液池;

5)以第二离心力的离心速度离心,使洗液池(2)的PBST缓冲液进入并通过反应池,冲洗微珠及反应池,最终缓冲液进入废液池(8);

6)关闭芯片上的阀门,以第五离心力的离心速度离心,使酶液池(5)的酶标试剂进入反应池与微珠进行反应;

7)打开阀门(4),以第三离心力的离心速度离心,使反应池(3)中的酶标试剂流入废液池(8);

8)以第一离心力的离心速度离心,使洗液池(1)的PBST缓冲液进入并通过反应池,冲洗微珠及反应池,最终缓冲液进入废液池;

9)关闭阀门(4),以第六离心力的离心速度离心,使检测液池(6)中的液体进入反应池进行显色反应;

10)以第七离心力的离心速度离心,使终止液池(7)中的终止液进入反应池终止反应,肉眼观察初步检测结果。

6.如权利要求5所述的一种血液中乙肝、丙肝和梅毒快速检测方法,其特征在于:还包括步骤12)用酶标仪对反应池(3)中的试剂进行吸光度检测,得出最终结果。

7.如权利要求5所述的一种血液中乙肝、丙肝和梅毒快速检测方法,其特征在于:

1)制作权利要求1所述血液快速检测的微流控芯片,并且将包被了相应抗体的微珠及相应的试剂封装进芯片中;

2)将制作好的芯片置于离心力驱动装置中;

3)通过反应池的进液口注入血液,血液进入反应池后,充分孵化10分钟;

4)启动离心力驱动装置,以200rpm的离心速度离心,使反应池中的血液流入废液池;

5)以500rpm的离心速度离心,使洗液池2的PBST缓冲液进入并通过反应池,冲洗微珠及反应池,最终缓冲液进入废液池;

6)关闭芯片上的阀门,以1000rpm的离心速度离心,使酶液池的酶标试剂进入反应池与微珠进行反应;

7)打开阀门,以200rpm的离心速度离心,使反应池中的酶标试剂流入废液池;

8)以1800rpm的离心速度离心,使洗液池1的PBST缓冲液进入并通过反应池,冲洗微珠及反应池,最终缓冲液进入废液池;

9)关闭阀门,以3000rpm的离心速度离心,使A、B液进入反应池进行显色反应;

10)以5000rpm的离心速度离心,使终止液进入反应池终止反应,肉眼可见初步检测结果;

11)用酶标仪对反应池中的试剂进行吸光度检测,得出最终结果。

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