[发明专利]一株戈氏梭菌驯化株的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株戈氏梭菌驯化株(Derivatives of Clostridium ghonii,DCG)的应用，特别涉及戈氏梭菌驯化株在制备治疗非小细胞肺癌(Non-small cell lung carcinoma，NSCLC)药物中的应用，属于生物医药技术领域。

背景技术

目前实体肿瘤病理生理的理解越来越多的转向了其独特生长的微环境。实体瘤中心区以组织间压力升高、细胞pH降低、氧含量低以及肿瘤细胞异质性等为显著特点。肿瘤微环境也是肿瘤转移、侵润以及对对传统放化疗不敏感的重要原因。首先，实体肿瘤所包含的乏氧或坏死区域，由于乏氧区远离血管供血不丰富，并且肿瘤中心高组织间压的存在，使得乏氧区肿瘤细胞很难获得有效药物浓度，是传统化疗所不能有效治疗的地方。其次，放疗依赖于氧自由基的形成，造成有丝分裂细胞DNA的损伤，因此肿瘤中心氧自由基的缺乏减少了治疗过程中DNA损伤。第三，大多数化疗药物只对快速分裂肿瘤细胞有效，而对已停止分裂的乏氧肿瘤细胞、间质细胞及肿瘤组织结构等疗效差(纤连蛋白和胶原蛋白)。并且，传统放化疗常常缺乏对肿瘤细胞的特异性打击。

肿瘤厌氧微环境限制了传统放化疗及病毒疗法的疗效，但却为厌氧菌在肿瘤乏氧区内生长和发挥溶瘤特性提供了良好机会。DCG为专性厌氧革兰氏阳性芽孢杆菌，其存在两种生长状态:芽孢和营养体。DCG芽孢抗原性极弱，可作为制剂静脉注射降低对机体刺激。由于肿瘤血管组织结构紊乱，血液中的DCG芽孢极易进入肿瘤组织，在肿瘤低氧/坏死区萌发、繁殖，并分泌脂肪酶、蛋白酶等多种水解酶有效而不加区分的破坏肿瘤组织中各种细胞(肿瘤细胞、非癌间质细胞、活跃分裂、干细胞或静止细胞等)及肿瘤结构(纤连蛋白和胶原蛋白)，引起肿瘤大部分溶瘤坏死，实现肿瘤实质和间质的全部溶解消化。从根本上破坏并改变肿瘤微环境，这种肿瘤微环境的破坏有效抑制或逆转肿瘤生长和破坏再成瘤条件，甚至可导致整个肿瘤几乎完全破坏消失，为NSCLC深度治疗提供了可能。DCG分泌水解酶溶解瘤组织引发的炎症反应直接参与活性氧簇、蛋白酶及其他降解酶对肿瘤细胞的破坏作用。更重要的是，炎症反应可刺激机体产生强大细胞免疫反应，破坏残存肿瘤细胞微环境。

中国专利文献CN103374538A(申请号201210310374.4)公开了无毒非致病性戈氏梭菌(Clostridium ghonii)的衍生细菌菌株，其能抑制一种或多种实体瘤的生长、逆转或破坏一种或多种实体瘤。本发明还涉及包含所述衍生细菌菌株的组合物，用于靶向实体瘤的溶解。

但由于实体瘤的形成原因不同，因此不同菌株对实体瘤的作用都是特异性的。因此，进一步研究各种菌株对不同实体瘤的特异作用，成为本领域的研究热点。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一株驯化戈氏梭菌MW-DCG-HNCv-18菌株的应用。

一株驯化戈氏梭菌MW-DCG-HNCv-18菌株在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用。

驯化戈氏梭菌MW-DCG-HNCv-18菌株在强化梭菌-琼脂培养基上其菌落为白色，圆形，直径约为1～2mm，边缘粗糙，稍粘，其大小一致。其营养体为单独生长的短杆长直细胞，菌体宽约0.3～1.5μm、长8～16μm，革兰氏染色呈阳性。芽孢位于菌体近末端，呈卵圆形。该菌株为已知菌株，可以由澳大利亚国家计量研究院获得，菌株保藏号为V12/001485。

一种治疗非小细胞肺癌的药物，包括以驯化戈氏梭菌MW-DCG-HNCv-18菌株和多西他赛为药效成分，与药学上可接受的辅料制成的药物组合物。

根据本发明优选的，所述的驯化戈氏梭菌MW-DCG-HNCv-18菌株芽孢与多西他赛的比例为每毫克多西他赛联合5×10⁶个～3.0×10⁷个菌株芽孢。

进一步优选的，所述的驯化戈氏梭菌MW-DCG-HNCv-18菌株芽孢与多西他赛的比例为每毫克多西他赛联合1.0×10⁷个～2.0×10⁷个菌株芽孢。

更优选的，所述驯化戈氏梭菌MW-DCG-HNCv-18菌株芽孢与多西他赛的比例为每毫克多西他赛联合1.5×10⁷个菌株芽孢。

根据本发明优选的，所述的治疗非小细胞肺癌的药物剂型为芽孢冻干粉针剂。芽孢冻干粉针可采用低温冷冻干燥技术制备。