[发明专利]两色金鸡菊提取物作为制备治疗白癜风药物的应用在审
申请号: | 201410805391.4 | 申请日: | 2014-12-22 |
公开(公告)号: | CN104523796A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 王强;刘亚亚;李翔;杨洁 | 申请(专利权)人: | 新疆大学 |
主分类号: | A61K36/28 | 分类号: | A61K36/28;A61P17/00 |
代理公司: | 乌鲁木齐合纵专利商标事务所 65105 | 代理人: | 汤建武;周星莹 |
地址: | 830046 新疆维吾尔自治区*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金鸡 提取物 作为 制备 治疗 白癜风 药物 应用 | ||
1.一种两色金鸡菊提取物作为制备治疗白癜风药物的应用,其特征在于两色金鸡菊提取物按下述方法得到:第一步,取适量两色金鸡菊粉碎后得到碎两色金鸡菊,将碎两色金鸡菊平均分成4份,在4份碎两色金鸡菊中分别加入相应碎两色金鸡菊6倍至20倍重量的水、体积百分比为55%的乙醇水溶液、体积百分比为70%的乙醇水溶液和体积百分比为95%的乙醇水溶液进行浸泡,浸泡时间为1h到2h,浸泡后在温度为80℃至100℃下分别回流提取1次至3次,每次回流提取0.5h到2h,回流提取后将对应的滤液合并后得到对应的混合滤液,把对应的混合滤液减压浓缩至对应的混合滤液体积的1/5至1/6后得到对应的浓缩液,对应的浓缩液经真空冷冻干燥后得到水提取物、55%乙醇提取物、70%乙醇提取物和95%乙醇提取物;
第二步,在95%乙醇提取物中加入95%乙醇提取物1.5倍至4.5倍重量的水,振摇10分钟至30分钟使其溶解或混悬后,再加入95%乙醇提取物1.5倍至4.5倍重量的石油醚并搅拌均匀,静置3h至10h进行萃取,萃取3次至5次,萃取后得到第一萃余相,合并每次的萃取相得到第一萃取相,第一萃取相过滤后得到第一滤液,第一滤液减压浓缩至第一滤液体积的1/6到1/5后得到第一浓缩液,第一浓缩液经真空冷冻干燥后得到石油醚萃取物;
第三步,在第一萃余相中加入第一萃余相1.5倍至4.5倍重量的氯仿并搅拌均匀,静置3h至10h进行萃取,萃取3次至5次,萃取后得到第二萃余相,合并每次的萃取相得到第二萃取相,第二萃取相过滤后得到第二滤液,第二滤液减压浓缩至第二滤液体积的1/6到1/5后得到第二浓缩液,第二浓缩液经真空冷冻干燥后得到氯仿萃取物;
第四步,在第二萃余相中加入第二萃余相1.5倍至4.5倍重量的乙酸乙酯并搅拌均匀,静置3h至10h进行萃取,萃取3次至5次,萃取后得到第三萃余相,合并每次的萃取相得到第三萃取相,第三萃取相过滤后得到第三滤液,第三滤液减压浓缩至第三滤液体积的1/6到1/5后得到第三浓缩液,第三浓缩液经真空冷冻干燥后得到乙酸乙酯萃取物;
第五步,在第三萃余相中加入第三萃余相1.5倍至4.5倍重量的正丁醇并搅拌均匀,静置3h至10h进行萃取,萃取3次至5次,萃取后得到第四萃余相,合并每次的萃取相得到第四萃取相,第四萃取相过滤后得到第四滤液,第四滤液减压浓缩至第四滤液体积的1/6到1/5后得到第四浓缩液,第四浓缩液经真空冷冻干燥后得到正丁醇萃取物。
2.根据权利要求1所述的两色金鸡菊提取物作为制备治疗白癜风药物的应用,其特征在于第四步中,按100毫升水中加入4克乙酸乙酯萃取物计,向水中加入乙酸乙酯萃取物混合均匀配成乙酸乙酯萃取物水溶液,取树脂柱体积的1%至2%的乙酸乙酯萃取物水溶液加入到树脂柱中,上柱液流速为1.4Bv/h至1.7Bv/h,然后分别用5倍树脂柱体积的水、体积百分比为10%的乙醇水溶液、体积百分比为30%的乙醇水溶液、体积百分比为50%的乙醇水溶体积液、体积百分比为70%的乙醇水溶液和体积百分比为95%的乙醇水溶液以1.4Bv/h至1.7Bv/h的流速进行洗脱,洗脱后分别收集洗脱液,将收集到的洗脱液分别减压浓缩至对应洗脱液体积的1/6到1/5后得到对应的浓缩液,对应的浓缩液经真空冷冻干燥后得到水洗脱物、10%乙醇洗脱物、30%乙醇洗脱物、50%乙醇洗脱物、70%的乙醇洗脱物和95%乙醇洗脱物;树脂为AB-8大孔树脂。
3.根据权利要求2所述的两色金鸡菊提取物作为制备治疗白癜风药物的应用,其特征在于树脂柱按下述方法得到:用无水乙醇浸泡树脂22h至26h后装入层析柱中,用3倍至5倍层析柱体积的无水乙醇进行洗涤,洗涤后放出乙醇洗涤液,然后加10倍至12倍层析柱体积的蒸馏水进行冲洗,冲洗后放出蒸馏水洗涤液,再依次用3倍至5倍层析柱体积的盐酸水溶液和氢氧化钠水溶液浸泡层析柱中的树脂,每次浸泡2h至4h,浸泡后依次放出盐酸洗涤液和氢氧化钠洗涤液,最后用去离子水洗至中性后得到树脂柱。
4.根据权利要求3所述的两色金鸡菊提取物作为制备治疗白癜风药物的应用,其特征在于盐酸水溶液为体积百分比为5%的盐酸水溶液;或/和,氢氧化钠水溶液为体积百分比为5%的氢氧化钠水溶液。
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