[发明专利]一种高度纯化胰激肽酶原的方法及含有胰激肽酶原的药物组合物

权利要求书

1.一种高度纯化胰激肽酶原的方法及含有胰激肽酶原的药物组合物，其特征在于，该方法包括如下步骤：

（1） 醋酸提取：将猪胰脏制成丙酮粉后，加醋酸溶液搅拌提取，离心，得上清液；

（2）丙酮沉淀：收集上清液，加入丙酮沉淀；

沉淀用丙酮、乙醚脱脂、脱水，干燥，得胰激肽酶原粗品；

（3）氯化钠-氨水、丙酮协同除杂：将粗品用氯化钠溶液溶解，用氨水调PH，搅拌混合，过滤，得滤液；将滤液中加入丙酮沉淀；

沉淀用丙酮、乙醚洗涤，干燥，得胰激肽酶原中间品；

（4）离子交换层析：将胰激肽酶原中间品溶于醋酸缓冲液中，离心，得上清液；取上清液，上DEAE-琼脂糖快胶柱吸附，吸附平衡后，用含氯化钠的醋酸缓冲液洗脱至基线，再用含氯化钠的醋酸缓冲液洗脱，收集洗脱液；将洗脱液透析脱盐，冻干，得胰激肽酶原精品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）中，胰激肽酶原中间品与醋酸溶液的比例为：1Kg:18~22L，醋酸溶液的浓度为：0.0005~0.0015mol/L,pH值为4.5。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）中，洗脱至基线的含氯化钠的醋酸缓冲液为含0.15~0.25mol/L氯化钠的0.01mol/L醋酸缓冲液；第二次洗脱用的含氯化钠的醋酸缓冲液为含0.25~0.45mol/L氯化钠的0.01mol/L醋酸缓冲液；。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）中用新型的阴离子交换柱吸附，所用的离子交换介质为DEAE-琼脂糖快胶，DEAE-琼脂糖快胶与上清液的 体积比为：8~12：1。

5.一种药物组合物，其含有根据权利要求1-4制备的胰激肽酶原作为活性成分,还含有预胶化淀粉、糊精、糖粉、L-羟丙基纤维素、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁、EDTA-2Na 、75%乙醇。