[发明专利]一种复合磷酸酯酶的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地说涉及一种复合磷酸酯酶的制备方法。

背景技术

大麦经浸渍、发芽、干燥除根后得到干麦芽,其副产物麦芽根的数量占总投料量的3%~5%左右。我国现有的啤酒厂及专业麦芽生产厂家达数百家,年产麦芽根的数量非常大,可达到10万吨以上。由于人们对麦芽根营养价值的认识和了解不够,对其利用也仅局限于作为饲料使用。

为充分利用大麦芽生产的副产物——大麦芽根中的蛋白资源,采用国家标准方法测定麦芽根的主要成分,通过正交试验研究碱法提取麦芽根蛋白的最佳工艺条件。结果表明:麦芽根的蛋白质、灰分、水分、脂肪及粗纤维质量分数分别为29.2%、6.9%、6.42%、1.4%和10.7%。正交试验结果表明,麦芽根中蛋白提取的最佳工艺条件为浸提液pH6.5-9.5、料液比1:6-1:15(g/mL)、浸提时间11-18h、浸提温度20-40℃,在此条件下麦芽根蛋白质的浸提率为20%以上。该工艺提取麦芽根蛋白简便且提取率高。

利用大麦芽生产的副产物——大麦芽根，节约资源减少污染，创造新的收益。

发明内容

本发明的目的是一种复合磷酸酯酶的制备方法，制备复合磷酸酯酶。

本发明的技术方案是：利用复合磷酸酯酶溶于弱碱性溶液的性质，将其提取出来，利用其不溶于乙醇将其分离纯化，包括如下步骤：

（1）提取工序：取大麦芽根须，粉碎，投入浸泡槽内，加水，加入的水与大麦芽根须的比为6:1~15:1（L/Kg）；用氨水调pH6.5-9.5，温度20-40℃浸泡11-18小时；；

（2））再提取工序：抽滤，得滤液，滤渣再加水, 加入的水与大麦芽根须的比为2:1~4:1（L/Kg）；用氨水调pH6.5-9.5，温度20-40℃，浸泡2-6小时，抽滤，得滤液，弃滤渣；

（3）沉淀工序：合并两次滤液，在低温下进行浓缩，调pH4.5-6.5，加入乙醇，加入的乙醇与浓缩液的体积比为2:1~4:1（L/L）,沉淀，抽滤，收集沉淀；

（4）干燥工序：15-25℃下真空干燥，粉碎，过100-120目筛，即得复合磷酸酯酶。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

（1）提取工序：取大麦芽根须，粉碎，称重100Kg，投入浸泡槽内，加水600L，用氨水调pH6.5，温度20-25℃浸泡11小时；

（2）再提取工序：抽滤，得滤液，滤渣，称重80.8Kg，再加水162L；用氨水调pH6.5，温度20-25℃，浸泡3小时，抽滤，得滤液，弃滤渣；

（3）沉淀工序：合并两次滤液，得781L滤液，在低温下进行浓缩，调pH4.5，加入乙醇1562L,沉淀，抽滤，收集沉淀；

（4）干燥工序：15℃下真空干燥，粉碎，过100目筛，即得复合磷酸酯酶6.6Kg。

实施例2

（1）提取工序：取大麦芽根须，粉碎，称重20Kg投入浸泡槽内，加水300L，用氨水调pH8.5，温度35-40℃浸泡18小时；

（2）再提取工序：抽滤，得滤液，滤渣15Kg，再加水60L,用氨水调pH8.5，温度35-40℃，浸泡5小时，抽滤，得滤液，弃滤渣；

（3）沉淀工序：合并两次滤液，得380L在低温下进行浓缩，调pH6.5，加入乙醇1520L，沉淀，抽滤，收集沉淀；

（4）干燥工序：25℃下真空干燥，粉碎，过120目筛，即得复合磷酸酯酶1.47Kg。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。