[发明专利]除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途有效

专利信息
申请号: 201410810953.4 申请日: 2014-12-22
公开(公告)号: CN104630162A 公开(公告)日: 2015-05-20
发明(设计)人: 何健;姚利;贾兴军;谢香庭;吴业春;陶青;丁德荣 申请(专利权)人: 北京大北农科技集团股份有限公司生物技术中心;南京农业大学
主分类号: C12N9/02 分类号: C12N9/02;C12N15/53;C12N15/55;C12N9/06;C12N9/80;C12N9/78;C12N15/84;A01H5/00;A01H1/02;A01G7/06
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摘要:
搜索关键词: 除草剂 耐受 蛋白质 编码 基因 用途
【说明书】:

技术领域

发明涉及一种除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途,特别是涉及一种对除草剂麦草畏具有耐受性的蛋白质、其编码基因及用途。

背景技术

杂草可以迅速耗尽土壤中作物和其它目的植物所需要的有价值的养分。尽管目前可以得到耐受除草剂草甘膦、草丁膦、2,4-D和其它除草剂处理的转基因植物,但是还存在空白区域,如所控制的杂草范围、开发额外的除草剂耐受性作物等。此外,耐受上述除草剂的杂草的出现(尽管通常是局部的和可变的)造成了对额外或备选的杂草控制措施的需要。

已经证明耐受除草剂性状在商业上是有价值的,因此需要增加耐受其它除草剂的植物和管理难以控制的杂草种类的选项,以避免过度依赖任何单一除草剂,尤其需要针对环境友好的并且在控制杂草方面高度有效的除草剂而开发除草剂耐受性。麦草畏是有效且环境友好的除草剂之一,其已经被农民使用40多年了,麦草畏可用于控制玉米、高粱、小米、牧草、干草、牧场、甘蔗、芦笋、草皮和草籽作物中一年生和多年生阔叶杂草和几种窄叶杂草;与此同时,麦草畏可以伤害许多商业作物和双子叶植物,如大豆、棉花、豌豆、马铃薯、向日葵和油菜,上述作物/植物对于低水平的麦草畏都是特别敏感的。尽管如此,麦草畏在控制杂草生长中仍然是有效的,并且是重要的。

已报道从嗜麦芽假单胞菌(Pseudomonas maltophilia)分离了编码麦草畏单加氧酶(DMO)的基因,其为铁氧还蛋白依赖型并赋予对麦草畏的耐受性。DMO参与将除草剂麦草畏(3,6-二氯-邻-茴香酸)转化为无毒的3,6-二氯水杨酸(DCSA),表达DMO基因的植物具有对麦草畏的耐受性。

由于目前发现的麦草畏耐受型基因均及其相似,所以需要更多新型的麦草畏耐受型基因以避免过度依赖一种麦草畏耐受型基因,使麦草畏-麦草畏耐受型作物在商业上具有更广阔的应用空间。

发明内容

本发明的目的是提供一种除草剂耐受性蛋白质、其编码基因及用途,本发明旨在提供一种新的DMT50基因,所述DMT50蛋白在植物中对麦草畏除草剂具有较高的耐受性。

为实现上述目的,本发明提供了一种蛋白质,具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。

为实现上述目的,本发明提供了一种基因,包括:

(a)编码所述蛋白质的核苷酸序列;或

(b)在严格条件下与(a)限定的核苷酸序列互补的核苷酸序列;或

(c)具有SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列;或

(d)具有SEQ ID NO:14所示的核苷酸序列。

所述严格条件可为在6×SSC(柠檬酸钠)、0.5%SDS(十二烷基硫酸钠)溶液中,在65℃下杂交,然后用2×SSC、0.1%SDS和1×SSC、0.1%SDS各洗膜1次。

为实现上述目的,本发明还提供了一种组合蛋白,包括至少由第一核苷酸序列和第二核苷酸序列编码,所述第一核苷酸序列编码所述蛋白质。

进一步地,所述第二核苷酸序列编码甲基四氢叶酸还原酶、甲酰四氢叶酸脱甲酰酶和/或次甲基环化酶。

更进一步地,所述甲基四氢叶酸还原酶具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列,所述甲酰四氢叶酸脱甲酰酶具有SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列,所述次甲基环化酶具有SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。

优选地,所述第二核苷酸序列具有SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7和/或SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列。

具体地,编码所述组合蛋白的核苷酸序列具有SEQ ID NO:26所示的核苷酸序列。

更具体地,编码所述组合蛋白的核苷酸序列具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

为实现上述目的,本发明还提供了一种表达盒,包含在有效连接的调控序列调控下的所述基因或编码所述组合蛋白的核苷酸序列。

进一步地,所述调控序列为叶绿体转运肽,所述叶绿体转运肽与所述除草剂耐受性基因有效连接。

优选地,所述叶绿体转运肽的核苷酸序列具有SEQ ID NO:16所示的核苷酸序列。

为实现上述目的,本发明还提供了一种包含所述基因、编码所述组合蛋白的核苷酸序列或所述表达盒的重组载体。

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