[发明专利]适用于检测转基因抗虫棉花的质粒标准分子及其用途在审
| 申请号： | 201410811213.2 | 申请日： | 2014-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN105779573A | 公开（公告）日： | 2016-07-20 |
| 发明（设计）人： | 孙国清;郭三堆;张锐;王远;王林;张海鹏 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/63;C12N15/32 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 李志东 |
| 地址： | 100081 北京市海淀区中关*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 适用于 检测 转基因 棉花 质粒 标准 分子 及其 用途 | ||
1.一种质粒标准分子，其特征在于，所述质粒标准分子包括Cry1A基因，CPTI基因， polyA序列，35S启动子序列和NOS终止子序列。
2.权利要求1的质粒标准分子，其特征在于，所述质粒标准分子包括依次连接的35S 启动子序列，Cry1A基因，polyA序列，NOS终止子序列，35S启动子序列，CPTI基因， NOS终止子序列；
任选的，所述质粒标准分子包含LacZ基因。
3.权利要求1或2的质粒标准分子在检测农作物中的CPTI外源基因和以下至少之一 的Bt外源基因中的用途：Cry1Ab，Cry1Ac和Cry1Ab/Ac。
4.权利要求3的用途，其特征在于，所述农作物为转Bt和/或CPTI基因的棉花。
5.权利要求1或2的质粒标准分子的制备方法，其特征在于，包括，
(1)获取Bt-CpTI基因表达质粒；
(2)酶切所述表达质粒，获得Bt-CpTI基因片段；
(3)将所述Bt-CpTI基因片段连接到克隆载体上，获得所述质粒标准分子。
6.权利要求5的方法，其特征在于，所述表达质粒包括依次连接的35S启动子序列， CryIA基因，polyA序列，NOS终止子序列，35S启动子序列，CPTI基因和NOS终止子序 列。
7.权利要求5的方法，其特征在于，所述酶切为EcoR1和HindIII双酶切。
8.权利要求5的方法，其特征在于，所述克隆载体为pEASY-T3。
9.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1或2的质粒标准分子；
任选的，所述试剂盒包括SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，SEQIDNO：3和SEQID NO：4。
10.权利要求9的试剂盒在PCR检测转Bt和/或CPTI抗虫基因棉花中的用途。
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