[发明专利]解淀粉芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明涉及解淀粉芽孢杆菌及其应用，所涉及的菌的分类命名为：解淀粉芽孢杆(Bacillus amyloliquefaciens)，保藏编号为CGMCC NO.9847。所涉及的应用为上述解淀粉芽孢杆菌用于生产超敏蛋白的应用。本发明同时还涉及一种超敏蛋白水剂生物农药。本发明利用制备的超敏蛋白水剂，对烟草、西瓜、水稻三种作物做防效及增产效果试验。试验结果均表明，超敏蛋白水剂不仅对植物起促生壮苗作用，而且能有效提高植株抗病能力。

技术领域

本发明涉及农药技术，具体涉及解淀粉芽孢杆菌发酵生产超敏蛋白的应用及利用超敏蛋白开发的农药。

背景技术

1992年WEI等首次从梨火疫欧文氏病菌(Erwinia amylovora)Ea321hrp基因簇中分离到由hrpN基因编码的蛋白类激发子Harpin_Ea，这种稳定的多肽类化合物命名为超敏蛋白(Harpins)。随后，各国的生物科学工作者又先后从丁香假单胞菌和青枯假单胞菌中分离到类似的富含甘氨酸、对蛋白酶敏感、热稳定的亲水性蛋白分子。这些蛋白均能诱导植物产生过敏性坏死反应，与植物的抗病性有关。

2001年美国Cornell大学和EDEN生物科技公司基于对Harpins的研究，共同开发和成功研制出具有抗病防虫功能的广谱性微生物蛋白农药Messenger。该产品是2001年生物农药中最具代表性的新产品之一，也是当前国际上利用高新技术手段开发生物农药最成功的例子。Harpins既能诱导植物产生过敏性坏死反应，同时也能诱导一系列的防卫反应。例如活性氧的迸发、细胞胞外pH的升高、Ga²⁺的进入和K⁺的排出、细胞胞壁富含羟脯氨酸的自动聚合、蛋白质磷酸化等。如过敏素类蛋白mvN在拟南芥悬浮细胞培养中，刺激K⁺外渗，同时也减少阴离子的产生，这说明Harpins具有调节不同细胞质膜离子通道的能力。

发明内容

本发明提供了一株解淀粉芽孢杆菌，该解淀粉芽孢杆菌的分类命名为：Bacillusamyloliquefaciens，保藏编号为CGMCC NO.9847。本发明的解淀粉芽孢杆菌已于2014年10月27日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。

本发明还提供了上述解淀粉芽孢杆菌用于生产超敏蛋白的应用。

可选的，上述应用包括将所述解淀粉芽孢杆在添加有异丙基-β-D巯基半乳糖苷的LB液体培养基中发酵培养生产超敏蛋白。

本发明同时提供了一种生物农药，该生物农药为超敏蛋白水剂。

可选的，上述生物农药由以下原料按质量百分比制成：harpins原药10％、表面活性剂2％～3％、抗冻剂1％～3％、稳定剂0.2％～0.4％、防腐剂0.1％～0.5％、pH调整剂0.5％～1.5％，余量为水，原料的重量百分比之和为100％。

可选的，上述表面活性剂选用烷基酚聚氧乙烯醚类、苯乙基酚聚氧乙烯醚类中的其中一种。

可选的，上述抗冻剂选用乙二醇或丙二醇。

可选的，上述稳定剂选用柠檬酸或对甲苯磺酸。

可选的，上述防腐剂选用山梨酸、山梨酸钾和丙酸钙其中一种。

可选的，上述pH调整剂选用木质素磺酸钠。

本发明的有益效果在于：

本发明所提供的解淀粉芽孢杆菌能够用于生产超敏蛋白。

本发明的超敏蛋白生产方法与一般生物蛋白质生产方法相比，其优点在于：培养基添加异丙基-β-D巯基半乳糖苷，可诱导细菌内蛋白的产生，增加蛋白提取量；。