[发明专利]一种提高粗品肝素钠溶解效率的方法

说明书

技术领域

本法说明涉及提取提纯制备原料药的方法，属于酶工程领域，具体是一种快速高效溶解粗品肝素钠的方法。

背景技术

肝素钠是由猪或牛的肠粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属粘多糖类物质，在动物体内多以肝素钠-蛋白质复合物的形式存在。医学上，肝素钠在体内外均有抗凝血作用，可延长凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间。临床上具有抗凝血、降血脂、保护内皮细胞、抗血小板积聚和释放、促纤溶、抑制动脉平滑肌细胞增殖、降低血液粘度和抗炎等作用。

目前是，国内大所属厂家采用物理搅拌或者化学物质溶解粗品肝素钠。物理方法，溶解速度太慢，且溶解的不够均匀，分子排布杂乱，杂质较多；化学方法，相对来说，速度较快，但是采用化学试剂会破坏分子活性，且容易产生副产物，不以去除。本工艺采用了酶解法，方法温和，而且速度较快，产生的副产物少且易去除。

发明内容

本发明提供了一种酶解法快递溶解粗品肝素钠的方法。

本发明的技术方案为：一种制备高纯度肝素钠的工艺，其步骤如下：

将粗品肝素钠溶入饮用水中，搅拌5--8小时，将其全部溶解；

将步骤（1）中溶解液，用盐酸溶液调PH至7.2--8.2，然后升温至45--55℃之间时加入4-14g/亿单位胃蛋白酶，再加入4-24g/亿单位胰酶，保温2--4小时；

将步骤（2）中酶解液在30～40分钟内升温至80--90℃，静止15-35分钟，搅拌，然后等降温至45--55℃时，用1--3mol/L氢氧化钠溶液调Ph至9.5-11.5，静止20--30小时，分层，过滤，留上清液待沉淀，下层沉淀进行离心，离心后留上层离心液；

待步骤（3）中上清液和离心液用弱碱性离子交换树脂吸附，用0.3--0.4g/L的氯化钠洗脱，连续洗脱两遍。

取步骤（4）中洗脱液，用2--6mol/L氢氧化钠溶液调Ph至9.5-11.5，然后加入3--5%双氧水，氧化10--12小时；

将步骤（5）中溶液用75--80%乙醇沉淀，再加入20--30g/L氯化钠溶液，静止沉淀10--12小时，取沉淀物，用75--80%乙醇溶解，静置24--30小时，弃去上层液，将不锈钢砂芯棒放在产品中，用真空泵通抽干；

将步骤（6）中产品放在真空干燥箱中，烘干75--85小时，得产品。

有益效果：

本发明用酶解法溶解粗品肝素钠，收率高于80%的高纯度肝素钠。达到中国药典标准。

具体实施方式

实施例

将50g粗品肝素钠溶入饮用水中，搅拌7小时，将其全部溶解；将溶解液用盐酸溶液调PH至7.2，然后升温至53℃之间时加入5g/亿单位胃蛋白酶，再加入5g/亿单位胰酶，保温3小时；将酶解液在36分钟内升温至87℃，静止20分钟，搅拌，然后等降温至53℃时，用2mol/L氢氧化钠溶液调PH至11.0，静止26小时，分层，过滤，留上清液待沉淀，下层沉淀放离心机离心，离心后留上层离心液；待上清液和离心液用弱碱性离子交换树脂吸附，用0.36g/L的氯化钠洗脱，连续洗脱两遍。取洗脱液用4mol/L氢氧化钠溶液调PH至11.0，然后加入4%双氧水，氧化11小时；将溶液用75%乙醇沉淀，再加入26g/L氯化钠溶液，静止沉淀11小时，取沉淀物，用75%乙醇溶解，静置27小时，弃去上层液，将不锈钢砂芯棒放在产品中，用真空泵通抽干；将产品放在真空干燥箱中，烘干80小时，得产品。得到的产品回收率为83.2%，各项指标均均符合中国药典要求。