[发明专利]一种耐重金属植物根际促生菌新种Burkholderia sp.D414及其应用

说明书

技术领域

本发明属于重金属污染环境的生物修复技术领域，具体涉及一种重金属(铅、镉、铜、锌)耐性植物促生菌新种及其应用。

背景技术

由于人类工业活动导致土壤中重金属元素含量增加，重金属元素能够通过作物吸收与富集的方式，通过食物链最终影响人类健康。植物通过根系从土壤吸收生长必须营养元素，在重金属污染土壤中，根系是首先暴露于重金属胁迫的植物器官，也是最先受重金属毒害的植物器官。与此同时，根际土壤中存在着数量和种类丰富的微生物种群，它们与植物根系以及土壤形成特殊微环境，是根际土壤中最重要的生物因素。研究发现，植物根际促生菌能够产生植物生长激素促进植物生长，改变根际微环境中重金属元素生物有效性，强化重金属污染土壤植物修复效率。因此，分离筛选具有多种重金属耐受性，促进植物生长的优良植物根际促生菌新种，并研发相应功能菌剂对于土壤重金属污染修复具有重要意义。

发明内容

本发明目的是提供一株具有多重金属耐受性植物根际促生菌新种Burkholderia sp.D414，以及含有该菌株的植物促生菌剂及其应用。

1.本发明从典型重金属复合污染稻田土壤中分离筛选出具有多种重金属耐受性，且具有较强植物促生特性的植物根际促生菌新种D414，分类命名为伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia sp.D414)。2013年2月05日保藏于布达佩斯条约承认的生物材料样品国际保藏单位“Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH，(DSMZ，德国微生物保藏中心)”，地址：Leibniz Institute DSMZ-German Collection of Microorganisms andCell Cultures Inhoffenstraβe 7B 38124 Braunschweig Germany(德国不伦瑞克市德国莱布尼茨DSMZ微生物和细胞培养物保藏中心，38124)，保藏号为DSM 26823。

2.本发明所述耐重金属植物根际促生菌新种Burkholderia sp.D414，通过梯度稀释法分离自典型重金属复合污染稻田土壤。该菌株对铅、镉、铜和锌多种重金属具有耐受性。

菌株D414形态特性描述如下：菌体大小为0.5-0.7×0.8-2.0μm,革兰氏阴性，好氧，如图1所示。在分离培养基(SMN)：(NH₄)₂SO₄,2gl^-1；Mannitol,5gl^-1K₂HPO₄,0.5gl^-1；MgSO₄,0.5gl^-1；NaCl,0.1gl^-1；FeSO₄,0.05gl^-1；MnSO₄,0.05gl^-1；琼脂粉20gl^-1；去离子水1000mL；pH6.8±0.2上形成单菌落呈黄白色，圆形凸起且具有清晰边缘。菌株D414能 够在10-50℃范围生长，其中最适生长温度为30℃，菌株D414能够在pH3.0-8.0范围内生长，最适生长pH为7.0。

菌株D414生理生化特征描述如下：菌株D414能够在无N阿须贝(Ashby's Nitrogen Free Medium)培养基上生长，吲哚阳性，具有脲酶，氧化酶，过氧化氢酶，硝基半乳糖酶活性，于此同时具有1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶活性，能够利用七叶灵，葡萄糖，阿拉伯糖，甘露糖，甘露醇，N-乙酰葡糖胺，苹果酸酯，葡糖酸盐，正癸酸，己二酸，柠檬酸盐，乙酸苯酯，D-核糖，D-木糖，D-核糖醇，D-果糖，D-鼠李糖，肌醇，山梨醇，水杨苷，D-纤维二糖，D-蜜二糖，D-龙胆二糖，D-来苏糖，海藻糖，D-阿拉伯醇。菌株D414硝酸盐还原反应阴性，明胶水解阴性，不能够利用精氨酸，赤藓糖醇，L-木糖，甲基-吡喃型木糖苷，L-山梨糖，己六醇。苦杏仁苷，熊果苷，D-乳糖，D-蔗糖，菊粉，D-松三糖，D-棉籽糖，淀粉，糖原，木糖醇，D-塔格糖，L-阿拉伯醇，葡糖酸钾，2，5-酮葡糖酸。