[发明专利]受铁-细菌密度二元信号调控的蛋白表达系统及其应用有效
| 申请号： | 201410817496.1 | 申请日： | 2014-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN105779487B | 公开（公告）日： | 2020-11-13 |
| 发明（设计）人： | 刘琴;张元兴;初腾;王蓬勃;王启要;肖婧凡 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学;上海纬胜海洋生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N1/21;A61K39/116;A61P31/04 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 受铁 细菌 密度 二元 信号 调控 蛋白 表达 系统 及其 应用 | ||
1.一种用于二元信号调控的表达构建物，其特征在于，所述表达构建物包括：细菌群体感应系统编码序列，和Fur蛋白结合位点序列，两者操作性连接；
所述的表达构建物中还包括：外源蛋白的编码序列，其与所述的细菌群体感应系统编码序列和Fur蛋白结合位点序列操作性连接；且所述的外源蛋白的表达受到铁离子浓度以及细菌浓度的双重调控；
所述的细菌群体感应系统编码序列包括：LuxR编码序列，LuxR启动子，LuxI启动子，LuxI编码序列；所述的Fur box位于LuxI启动子上，位于LuxI启动子的-10区；
所述的LuxR编码序列，LuxR启动子，LuxI启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第21-773位所示；
所述的Fur蛋白结合位点序列如SEQ ID NO:1中第970-988位所示；
所述的LuxI编码序列如SEQ ID NO:1中第1011-1592位所示。
2.如权利要求1所述的表达构建物，其特征在于，所述的外源蛋白的编码序列位于LuxI编码序列的下游。
3.如权利要求1所述的表达构建物，其特征在于，所述的外源蛋白是报告基因蛋白。
4.如权利要求1所述的表达构建物，其特征在于，所述的外源蛋白是GAPDH蛋白。
5.一种调控外源蛋白表达的方法，其特征在于，所述方法包括：将权利要求1-4任一所述的表达构建物转化宿主菌；从而，当所述宿主菌在含有二价铁离子的环境中时，重组表达系统处于“群体淬灭”状态，不表达外源蛋白；但所述宿主菌在缺乏二价铁离子的环境中并且菌浓达到使宿主菌产生响应的阈值，重组表达系统处于“群体感应”状态，表达外源蛋白。
6.一种重组的宿主菌，其特征在于，所述宿主菌中包含权利要求1-4任一所述的表达构建物。
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