[发明专利]用于检测肠道病毒71型IgM抗体的试剂盒及检测方法

说明书

技术领域

本发明主要涉及生物检测技术及医学检测领域。具体而言，本发明涉及用于检测肠道病毒71型IgM抗体的试剂盒及检测方法。

背景技术

肠道病毒EV71型感染是由人肠道病毒71型(EV71)引起的疾病的总称，临床上主要表现为手足口病，手足口病多在婴幼儿中爆发流行，部分EV71感染患儿表现为疱疹性咽峡炎，重症患者出现病毒性脑炎、病毒性脑脊髓膜炎、肺水肿、肺出血等。引起手足口病的病原，最常见的是柯萨奇病毒A16和肠道病毒71型；由肠道病毒71型感染引起的疾病发生重症感染的比例较大，病死率也较高，重症病例病死率可达10％-25％，因此病原学诊断意义重大。

肠道病毒71型(EV71)基因组为含有大约7.5Kb的单股正链RNA，包括5'端非编码区、3'端非编码区和由Pl，P2，P3所组成的多蛋白，共编码11种蛋白，其中4个结构蛋白VPl,VP2,VP3,VP4,7个非结构蛋白2A，2B，2C，3A，3B，3C，3D。其中VP 1,VP 2,VP 3暴露于病毒外壳的表面，为EV71主要的抗原变异位置；VP4包埋在病毒外壳的内侧与内部的RNA结合，其功能类似病毒外壳的锚，用以稳定病毒蛋白的结构。非结构蛋白2A为分裂初期先驱蛋白质，也与终止宿主细胞合成其本身所需蛋白有关；3C则参与大部分的蛋白裂解反应；3D为RNA聚合酶，在病毒RNA复制时主导转录及复制反应；2B，2C，3A，3B等四种蛋白则与病毒RNA的复制有关。

肠道病毒EV71的临床诊断主要依据三个方面:一是临床表现，二是血清学证据，三是病原学证据。由于肠道病毒EV71型感染临床表现多，因此肠道病毒EV71的血清学检测和病原学检测是目前最主要的依据。

肠道病毒71型IgM抗体的检测已经有相关文献报道，基本上多采用胶体金法或酶联免疫法，在成本，特异性等方面尚有诸多不足之处。蛋白质芯片由于技术的先进性已经成为技术发展的趋势，但是市场上为未见以蛋白质芯片法为基础的肠道病毒71型IgM抗体检测试剂盒的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种准确性好，特异性高的用于检测肠道病毒71型IgM抗体的试剂盒及检测方法。

本发明人提供了4条多肽。令人惊奇的是，本发明人发现，虽然所述4条多肽单独检测手足口病感染中的IgM抗体时的灵敏度均在19.7％～78.5％之间，远远未达到作为检测工具的要求，但是，在本发明以受试者来源的生物样本是否对所述4条多肽中的至少一条或一条以上有响应作为判定受试者是否已被疟原虫感染的指标的情况下，可以以高达93.0％的灵敏度(假阳性率低至1.9％)检测肠道病毒71型IgM抗体感染，进而用于手足口病的辅助诊断。

因此，本发明包括：

1.一种用于检测肠道病毒71型IgM抗体的试剂盒，其包括一个或多个固体载体，以及独立地连接于所述一个或多个固体载体上的下述多肽集合1：

SEQ ID NO：1所示的多肽；

SEQ ID NO：2所示的多肽；

SEQ ID NO：3所示的多肽；和

SEQ ID NO：4所示的多肽。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其用于检测肠道病毒71型抗体IgM。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，全部多肽独立地连接于同一固体载体上。

4.下述多肽集合1在制备用于检测肠道病毒71型抗体IgM的试剂盒中的用途：

SEQ ID NO：1所示的多肽；

SEQ ID NO：2所示的多肽；

SEQ ID NO：3所示的多肽；和

SEQ ID NO：4所示的多肽。

5.一种检测受试者是否为肠道病毒71型感染患者的方法，该方法包括：

使用权利要求1～3中任一项所述的试剂盒检测所述多肽集合1中的多肽对受试者来源的血液样本中的肠道病毒71型抗体IgM是否有响应；

当检测到所述多肽集合1中的任一个或一个以上多肽对受试者来源的血液样本中的肠道病毒71型抗体IgM有响应时，判定该受试者为肠道病毒71型感染患者。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述血液样本为全血、血浆或血清。

7根据权利要求5所述的方法，其中，所述受试者为具有手足口病临床症状的受试者。

发明的具体实施方式

多肽集合