[发明专利]亚硒酸化β-乳球蛋白及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于食品科学技术、有机化学以及生物制药领域等多学科交叉的领域，提供是一种亚硒酸化β-乳球蛋白及合成制备方法和应用。

背景技术

硒是生物机体必不可少的微量元素，是体内重要的抗氧化剂。硒通过调节硒蛋白或硒酶(谷胱甘肽过氧化物酶与磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶)影响生物体的自由基代谢、抗氧化功能、免疫功能、生殖功能和细胞凋亡等。国内外大量的研究表明，硒与机体的衰老密切相关。硒作为脑功能的调节者，参与多种伴随增龄出现的神经退行。

土壤硒是生物体所需的主要硒源，然而硒在地壳中的丰度极低，其分布也极不均衡，全球有40多个国家和地区不同程度的缺硒，由此导致了许多地方性硒缺乏性疾病的发生，如克山病、大骨节病等。我国是世界上严重缺硒的国家之一，大约72％的地域面积处于不同程度的缺硒状态。日常饮食无法满足人体的生理需要，因此，维持人体正常的生理机能有赖于外源硒的摄取。然而，无机硒的治疗剂量和中毒剂量的范围非常狭窄，而硒的抗氧化作用等往往依赖于较高的剂量。有机硒的毒性比无机硒小，生物利用率高，在激发免疫反应上也比无机硒显著。因此，高效低毒的有机硒源的合成与功能研究对于维持人体正常生理机能、延缓衰老有重要意义。

β-乳球蛋白(β-lactoglobulin，β-Lg)是一种重要的乳清蛋白，约占牛乳乳清蛋白总量的50％。乳清一度被认为是乳品工业中乳酪、干酪等乳制品加工的废弃物，只将其进行简单加工制成乳清粉或浓缩乳清蛋白等低附加值产品。随着国民经济的发展和人们生活水平的提高，乳品工业发展迅速，已成为我国食品工业重要的支柱产业之一。乳清副产品的开发利用备受人们关注。乳清蛋白主要成分β-乳球蛋白分子量约为18kDa，由162个氨基酸残基组成，含有多种必需氨基酸，其中含有3个精氨酸残基，氨基酸比例合理，是一种天然优质蛋白。由于每个β-乳球蛋白分子含有三个精氨酸残基，能够结合三个亚硒酸根，如果每人每日摄取10克β-乳球蛋白，同时就能摄入0.07毫克左右的硒，正好在硒摄取量的正常范围0.05-0.1毫克之间，所以利用β-乳球蛋白进行硒化，有利于β-乳球蛋白和硒的共同开发利用。β-乳球蛋白真空调控硒化技术及硒化β-乳球蛋白抗衰老分子机制的研究对于其它新型有机硒化蛋白的开发研制及硒蛋白调控抗衰老功能性研究具有重大理论意义，并具有实际应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种亚硒酸化β-乳球蛋白及制备方法和应用。本发明通过氧化-还原法将亚硒酸根导入到β-乳球蛋白精氨酸胍基的亚胺基团上生成亚硒酸化β-乳球蛋白，本合成制备方法工艺简单，产品收率高。

本发明的目的是这样实现的：

一种亚硒酸化β-乳球蛋白，在β-乳球蛋白的精氨酸胍基的亚胺基团上导入亚硒酸根，形成亚硒酸化β-乳球蛋白。

一种亚硒酸化β-乳球蛋白的制备方法，步骤如下

⑴制备亚硒酸；

⑵将β-乳球蛋白加入到亚硒酸溶液中；

⑶亚硒酸根的导入：将步骤⑵的溶液加入氧化剂，在真空，35-45℃，反应3-8h，将亚硒酸导入β-乳球蛋白上的精氨酸残基，生成亚硒酸化β-乳球蛋白；

⑷将亚硒酸化β-乳球蛋白分离、洗涤后获得亚硒酸化β-乳球蛋白产物。

而且，当步骤⑶反应结束后溶液中有剩余的强氧化剂或亚硒酸根时，用分子量3000Da-7000Da的超滤膜将上步分子量较小的强氧化剂以及未能导入的亚硒酸根过滤除去。

而且，所述步骤⑷用乙醇沉淀离心得到亚硒酸化β-乳球蛋白，将沉淀用乙醇洗涤2-4次，完全除去无机硒，真空冷冻干燥后得到亚硒酸化β-乳球蛋白产物。

而且，所述氧化剂为氯酸、氯酸盐、次氯酸、次氯酸盐或双氧水。

亚硒酸化β-乳球蛋白作为保健品的应用。

亚硒酸化β-乳球蛋白作为化妆品的应用。

亚硒酸化β-乳球蛋白作为制备提高机体免疫力的药品的应用。

本发明的优点和积极效果是：

1、本发明的原料β-乳球蛋白来源于工业废料乳清，在充分利用了废弃资源的同时又降低了成本，且β-乳球蛋白是一种营养价值高的天然优质乳源性蛋白质，在其中导入亚硒酸根得到的亚硒酸化β-乳球蛋白在补充硒的同时还能提供丰富的营养，是优质的有机硒源。

2、该亚硒酸化β-乳球蛋白的制备技术是利用生物界中常见的氧化-还原现象实现了β-乳球蛋白的亚硒酸化，在本制备方法当中，可以使用来源广泛的氧化-还原剂，如氯酸及其氯酸盐、次氯酸及其次氯酸盐、双氧水和高锰酸钾等均能够使亚硒酸结合到β-乳球蛋白上，氧化-还原剂的浓度可以是任一浓度。