[发明专利]一种隔断式真菌异核体快速检出培养基组及其制备方法

说明书

技术领域

本发明专利涉及一种微生物杂交技术，特别是一种真菌单孢杂交异核体快速检出的培养基组及其制备方法。

背景技术

目前，众所周知，利用生物技术进行孢子杂交是获得优质高产真菌特别是食用菌新品种的有效方法，尤其是在食用菌产业上尤为多见。

目前，我国食用菌产出已成为农业生产上的一个特色产业，有的地方已成为与支柱产业，我国的食用菌产量在全世界是第一位的，已成为全世界的食用菌生产大国。

我国虽然是世界上的食用菌生产大国，但不是食用菌生产强国，为什么说不是食用菌生产强国，其主要原因是单产较低，靠的是广种薄收，如白菇，荷兰的产量是每平方米产30公斤，而我国最高的产量只有15公斤，所以在技术上，我国急需培育高产品种。

培育一个高产品种最少要3-5年，而这其中单孢杂交虽然时间短，工作量确是最大的，主要工作量都用在异核体的检出上。

单孢杂交后，形成成千上万的异核体，而这些异核体中，按照微生物学的遗传规律，正相应变异的为极少数，多数是负相应变异的，只有正相应变异的（也称正能量）才有高产和优质及抗性强的特性，而负相应变异的就没有这些特性。

实践中，要把这些正相应变异的异核体检出来，工作量是相当大的，就象大海捞针一样。

发明内容

本发明的目的，是提供一种隔断式真菌异核体快速检出培养基组，本发明能在千万个变异的异核体中，将具有优势的异核体迅速检出，减少了科研工作量，提高了工作效率。

本发明的另一个目的，是提供一种隔断式真菌异核体快速检出培养基组的制备方法。

采用的技术方案是：

一种隔断式真菌异核体快速检出培养基组，由贫泛培养基和增富培养基组成，装设在一个试管里。贫泛培养基位于试管的下部，增富培养基位于试管的上部，中间用3-6层高压聚丙烯薄膜隔开。

所述贫泛培养基主要是由NH₄CL 2-4g、NaNO₃ 2-4g、NH₄H₂PO₄ 2-3g、多维葡萄糖2-3g、KH₂PO₄ 2-4g、 MGSO42-4g、NaCL 2-4g、MnSO₄ 2-4g、CaCL₂ 2-4g、ZnSO₄2-4g、NaHCO3 1g、土豆150-300 g、琼脂20-30 g、维生素B₁ 10mg和维生素B₂ 10mg制备成。

增富培养基主要是由5%的棉籽皮浸出液1000ml、土豆200 g、多维葡萄糖20g、琼脂25g、MGSO43g、KH₂PO₄ 3g、NaCL 3g、MnSO₄ 3g、CaCL₂ 3g、ZnSO₄3g、蛋白胨5g、酵母膏6g、维生素B₁　10mg、维生素B₂　10mg和NaHCO3 1g制备成。

上述贫泛培养基采用梯度法研制出；

上述增富培养基用拉丁正交实验法研制出。

贫泛培养基的制备方法，包括下述步骤：

1、土豆洗净去外皮，用刀切成5mm×5mm的方块，称重取150-300 g，加水至1000ml，煮沸30分钟，然后用4层纱布过滤，水份不足1000ml，加水至1000ml，备用。

2、取步骤1制备的土豆滤液1000 ml，加入20-30g琼脂，加热，搅拌至琼脂全部溶化，过滤，定容1000 ml，然后在搅拌中加入NH₄CL 2-4g、NaNO₃ 2-4g、NH₄H₂PO₄ 2-3g；、多维葡萄糖2-3g、MGSO4 2-4g、 KH₂PO₄ 2-4g、NaCL 2-4g、MnSO₄ 2-4g、CaCL₂　2-4g ZnSO₄3g和NaHCO3 1-1.5g，待搅拌使无机盐充分溶化后，放入高压灭菌器中，在120℃、0.118mpa灭菌40分钟，即得。

增富培养基的制备方法，包括下述步骤：