[发明专利]一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法有效
申请号: | 201410825519.3 | 申请日: | 2014-12-25 |
公开(公告)号: | CN104488723A | 公开(公告)日: | 2015-04-08 |
发明(设计)人: | 杨镇;龚娜;李学龙;王娜;陈珣;刘国丽;肖军;曹君;肖伟;宋艳雨;李跃 | 申请(专利权)人: | 辽宁省农业科学院微生物工程中心 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 天津滨海科纬知识产权代理有限公司12211 | 代理人: | 杨慧玲 |
地址: | 110161辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 朝鲜 淫羊藿 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)外植体选择与消毒:春季4月下旬,取朝鲜淫羊藿野生根茎,带有完整越冬芽,且越冬芽饱满,以根部分蘖芽作为外植体,经表面消毒后备用;
(2)培养基的配制:配制基本培养基、诱导分化培养基、继代增殖培养基、生根培养基1号、生根培养基2号;
(3)诱导培养:在无菌条件下切下0.5-1cm的芽,将经表面消毒的根部分蘖芽茎段芽向上接种于诱导分化培养基中,培养30-45天后,诱导分蘖芽萌芽,然后分化出丛生芽;
(4)增殖培养:当丛生芽长至2-3cm时,在无菌条件下将丛生芽切成单株,接入继代增殖培养基中,培养30-45天增殖出不定芽;根据对组培苗数量的要求,每隔30-45天按同样方法进行组培苗再增殖培养;
(5)生根培养:将生长至3-5cm的组培苗,接种到生根培养基中进行生根培养;所述组培苗先在生根培养基1号培养条件下培养7天后,再转至生根培养基2号中,诱导其生根;
(6)组培苗的驯化与移栽:当组培苗生长至5-8cm时,先进行组培苗的驯化,再移栽入草炭、珍珠岩、蛭石的混合基质中。
2.根据权利要求1所述的一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法,其特征在于:所述步骤(1)中的表面消毒包括如下处理步骤:首先在流水下冲洗3h,用洗衣粉清洗表面附属物,置于超净工作台中无菌水清洗2遍,75%乙醇表面消毒30s,然后用无菌水冲洗5遍;再用0.1%的氯化汞消毒2min,用无菌水冲洗3遍,用手术刀剥去外层保护层,再在0.1%氯化汞中浸泡2min,最后用无菌水冲洗3-5次。
3.根据权利要求1或2所述的一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法,其特征在于:所述培养基的组分和含量如下:
(1)基本培养基:WPM培养基+蔗糖或白糖30g/L+琼脂4.5g/L,调节pH值为5.6-5.8;
(2)诱导分化培养基:基本培养基+6-BA 0.5-1.5mg/L+IBA 0.1-0.5mg/L+GA30.3-1mg/L;
(3)继代增殖培养基:基本培养基+6-BA 0.5-1.5mg/L+IBA 0.3-0.5mg/L;
(4)生根培养基:
生根培养基1号:1/2WPM培养基+蔗糖或白糖15g/L+琼脂4.5g/L+IBA 0.3-0.5mg/L;
生根培养基2号:1/2WPM培养基+蔗糖或白糖15g/L+琼脂4.5g/L。
4.根据权利要求3所述的一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法,其特征在于:所述培养基的组分和含量如下:
(1)基本培养基:WPM培养基+蔗糖或白糖30g/L+琼脂4.5g/L,调节pH值为5.8;
(2)诱导分化培养基:基本培养基+6-BA 1.5mg/L+IBA 0.5mg/L+GA3 0.5mg/L;
(3)继代增殖培养基:基本培养基+6-BA 1.5mg/L+IBA 0.5mg/L;
(4)生根培养基:
生根培养基1号:1/2WPM培养基+蔗糖或白糖15g/L+琼脂4.5g/L+IBA 0.3mg/L;
生根培养基2号:1/2WPM培养基+蔗糖或白糖15g/L+琼脂4.5g/L。
5.根据权利要求1或2所述的一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法,其特征在于:所述方法的培养条件为:光照强度为1500-3000lx,光照时间为12h/d,培养室温度为22±2℃。
6.根据权利要求1或2所述的一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法,其特征在于:所述混合基质由草炭:珍珠岩:蛭石按体积比2:1:1配制而成。
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