[发明专利]一种制备高纯度低分子肝素钠的工艺

权利要求书

1.一种制备高纯度低分子肝素钠的工艺，其具体步骤如下：

（1）将粗品肝素钠溶于Nacl溶液中，机械搅拌至肝素钠全部溶解，向溶液中加入碱液直至产生沉淀，静置，过滤除去不溶物，得滤液；

（2）将步骤（1）中滤液以碱液调pH至7.5—12.5，加入H2O2溶液，在5—33℃下反应2—5小时，得反应液；

（3）将步骤（2）得到的反应液升温至25—55℃，此后每隔2—5小时补加H2O2溶液，并调节pH；补料后共反应12—25h；

（4）向步骤（3）得到的反应液中加入吸附剂，搅拌并过滤，得到滤液；

（5）将步骤（4）得到的滤液通过已经平衡好的色谱柱，收集低分子量的肝素钠洗脱液；

（6）将步骤（5）中收集到的洗脱液用弱碱性离子交换树脂吸附，分别用三种浓度的Nacl溶液洗脱，收集第一种和第三种浓度的Nacl洗脱液并混合；

（7）将步骤（6）中收集的混合洗脱液，在磁力搅拌下降温至-8—11℃，再用乙醇沉淀、真空干燥得产品。

2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于：步骤（1）中Nacl溶液的质量百分浓度为1.0—2.1%；Nacl溶液的用量为1.8—3.2mL/g肝素钠粗品量；静置时间为0.9—3小时。

3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于：步骤（1）和步骤（2）的碱液均为NaOH或KOH溶液；碱液的浓度为0.5—2.5mol/L。

4.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于：步骤（2）和步骤（3）中所加入的H2O2溶液和Nacl溶液的体积比为2—6:100；步骤（2）中H2O2溶液的浓度为0.5—5.5mol/L，步骤（3）中H2O2溶液的浓度为0.6—3.4mol/L。

5.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于：步骤（3）中每次补加完H2O2溶液后测定pH，使pH在6.4—8.0之间。

6.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于：步骤（4）中所述的吸附剂为活性炭、皂土或硅酸盐；吸附剂的加入量为2.2—5.5g/100mlNacl溶液量。

7.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于：步骤（5）中所述的凝胶色谱柱为Sephadex ，样品层为10—30%柱床体积，柱的径/高为1:3—8；以质量百分浓度2—7%Nacl溶液平衡并洗脱，流速为一个柱床体积/1.0—2.5小时，手机40—100 分钟时的洗脱液。

8.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于：步骤（6）中三种浓度的Nacl溶液分别为0.05—0.45g/L、0.35—0.65g/L、0.60—0.95g/L；其洗脱时间均为1.6—2.9小时，样品层为10—30%柱床体积。