[发明专利]一种抗PD-1人源抗体

说明书

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种抗PD‑1人源抗体。本发明提供一种抗PD‑1人源抗体，其抗体重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO:2或其保守型变异序列，其抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO:4或其保守型变异序列。本发明所提供的抗PD‑1人源抗体在哺乳动物细胞中具有较高的表达量，并且对PD‑1具有明显的亲和力和抑制配体‑受体结合的能力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种抗PD-1人源抗体。

背景技术

T细胞的活化是免疫系统发挥作用的重要步骤，不仅需要抗原递呈细胞(APC)所提供的第一信号，同时也受到共刺激信号(第二信号)的调节。共刺激信号是一类细胞表面的膜蛋白，起到协同调节T细胞增殖、活化及分化的作用。

细胞程序性死亡受体1(programmed death 1，PD-1)，也称CD279，是一种重要的免疫抑制分子，属于免疫球蛋白超家族CD28家族成员，分子量为50～55kD的I型跨膜糖蛋白。PD-1持续性表达在T细胞、B细胞、自然杀伤细胞、单核细胞以及骨髓细胞的表面。PD-1具有两个已知配体，PD-L1和PD-L2。目前，研究发现，PD-1与其配体PD-L1结合，可以传导抑制性的信号，减低淋巴结CD8+T细胞的增生，而且PD-1还可以借由调节Bcl-2基因，控制淋巴结中抗原特异性T细胞的聚积。而阻断PD-1与PD-L1的结合，可以有效阻止T淋巴细胞抑制信号的产生，从而打破免疫系统对自身组织的外周免疫耐受，促进T淋巴细胞的活化与增殖，以及细胞因子表达。因此将PD-1为癌症免疫治疗的靶点，成为目前的一个研究热点。

2011年百时美施贵宝上市了Yervoy(Ipilimumab)，作为首个免疫靶向药物被批准用于晚期黑色素瘤的治疗。Yervoy是一种抗细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的单克隆抗体，阻断CTLA-4与其配体B7的结合。该药单药有效率仅10％。最近，百时美施贵宝开发的针对PD-1的单克隆抗体Opdivo(Nivolumab)，其临床结果显示单药的疗效超过了Yervoy，有效率达到了35％，并对既往使用过Yervoy的患者同样有效。除了在转移性黑色素瘤的治疗上具有显著作用外，Opdivo还在结直肠癌、非小细胞肺癌、前列腺癌或肾癌等治疗上开展临床试验。

因此研发新型的抗PD-1单克隆抗体，用于癌症的免疫治疗，使其具有更低的毒副作用，更佳的临床药效，成为目前的研究热点，也将给患者提供更多的药物选择。

发明内容

鉴于以上所述现有技术，本发明的目的在于通过人源抗体库筛选高亲和力的新型抗PD-1的人源抗体，并验证其相关功能，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种抗PD-1人源抗体，其抗体重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO:2或其保守型变异序列，其抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQID NO:4或其保守型变异序列。

所述抗PD-1人源抗体可以是抗体的全长序列，也可以是抗PD-1人源抗体的片段，所述片段为Fab、Fab’、F(ab’)₂、Fv或scFv等。

优选的，所述抗PD-1人源抗体是人源的。

更优选的，所述抗PD-1人源抗体为IgG₁、IgG₂或IgG₄型抗体。

本发明进一步提供所述抗PD-1人源抗体的衍生物，所述衍生物为PD-1人源抗体的片段、抗体/抗体片段-因子融合蛋白、抗体/抗体片段-化学偶联物；所述抗PD-1人源抗体的片段为Fab、Fab’、F(ab’)₂、Fv或scFv等。

所述抗体/抗体片段-因子融合蛋白具体为抗体-因子融合蛋白、或抗体片段-因子融合蛋白。

所述抗体/抗体片段-化学偶联物具体为抗体-化学偶联物、或抗体片段-化学偶联物。