[发明专利]一种用于红百合组织培养的培养基

说明书

技术领域

本发明属于植物生物技术领域，具体地说，涉及一种红百合的组织培养中各个阶段的培养基。本发明筛选出用于红百合组织培养中不同时期的最佳培养基，确定了培养基中各激素的配比，按照本发明的配方配制的培养基可满足了红百合各个时期的营养需要和生长发育。

背景技术

红百合是百合科，多年生草本，为百合之异种。花瓣红色，花期5-8月。百合属植物种类全世界约有100多种，我国原产约有55种。红百合就生长在内蒙古干旱、半干旱地区，有顽强的生命力，可以在野外顺利越冬，在雨水少、无浇灌的情况下也能正常生长，在性能和美观上都能达到绿化的要求，可以在抗旱绿化景观中加以利用和推广。但由于来自人类或非人类两方面的威胁，使其种群数量存在着自然退化问题并且组培扩繁中出现玻璃化现象导致工厂化育苗数量受限。解决的办法就是改良现有对百合的组织培养方法，这是快速繁殖、脱毒复壮和降低玻璃化的有效方法。

百合的组织培养始于20世纪50年代，自1957年Robb首次用百合鳞片进行组织培养获得成功后，百合离体繁殖技术日益成熟，优良品种的快速繁殖、新品种培育以及种质资源保存等方面发展较快。迄今为止，国内外组织培养成功的百合种及品种已超过数百个，但多见于报道的是用于鲜切花生产的栽培品种，对中国野生百合的组织培养研究较少。总结近20年来的文献数据，仅十余种野生百合组织培养成功，有关红百合的更是屈指可数。红百合的人工繁殖仍主要采用种球繁殖、分植小鳞茎及鳞片扦插法，繁殖数量有限且极易导致病害感染和品质退化。目前可用于解决退化问题和更新复壮的组织培养法繁殖研究较少，因此深入开展红百合组织培养研究已成为科研工作者亟待进行的工作之一。

用我国丰富的野生资源进行品种创新，应用多样化的育种手段，在重视常规杂交育种的基础上，结合现代生物技术手段进行新品种选育，同时以脱毒组培种苗作为生产性原种来进行种球的工厂化开发，是百合组织培养的发展方向。组织培养法繁殖取材方便，不受自然条件的限制，可以不断进行大量繁殖，是红百合引种栽培、快速繁殖、脱毒复壮以及新品种培育的最有效方法，可以在短期内获得大量小苗，解决了栽培中种源较少的问题，为红百合今后的研究以及规模化、产业化开发利用提供了理论依据。

组织培养在离体培养条件下，不同植物以及同种植物不同部位的组织细胞对营养要求不同，只有满足了它们各自的特殊要求，才能更好地生长发育。掌握培养基的配制及筛选方法是取得组培成功的关键环节之一。本发明系统地研究了红百合组培中不同阶段的最佳培养基。

发明内容

组织培养的完整过程一般分为制定培养方案、外植体选择与处理、接种、初代培养、继代培养、壮苗与生根培养、试管苗的驯化移栽等几个技术环节。组织培养在离体培养条件下，不同植物以及同种植物不同部位的组织细胞对营养要求不同，只有满足了它们各自的特殊要求，才能更好地生长发育。而掌握培养基的配制及筛选方法是取得组培成功的关键环节之一。同时在实验室条件下，降低其玻璃化是一项需实践去摸索和探讨的新课题。在制定本项方案时可以参考的资料不多，都必须通过试验来逐一解决，关键要解决外植体取材部位、时期，各培养时期培养基的选择，培养条件以及成苗后快繁技术等。本发明以开发利用，降低成本为目标，以形成工厂化、产业化生产为目的，制定相应的工作计划和实施办法。

本发明的目的是筛选出用于红百合组织培养中不同时期的最佳培养基，确定了培养基中各激素的配比，按照本发明的配方配制的培养基可满足了红百合各个时期的营养需要和生长发育。

这是一项新颖而富于创造性的应用研究，在进行了信息搜集、汇总与分析的基础上制定了实施方案，全面、多方位的进行组培实验，在此主要介绍与本申请有关的筛选初代诱导→继代增值→生根培养等不同时期的培养基。使初代、增殖、生根各个时期的培养达到最佳效果。

本发明的实施方案包含红百合整个组织培养过程中各生育期的最佳培养基，它们是经过周密、反复多次试验得出的，是在基本培养基的基础上根据红百合各生育期的需要添加了不同类型的植物生长剂和不同的配比。

在本发明的实施方案中，提供了一种红百合组织培养过程各阶段所需的培养基，其特征在于，该培养基由初代诱导培养基、增殖培养基、生根培养基、结球培养基组成。这些红百合组培各个阶段最佳培养基是经过比较试验筛选出的。

本发明的实施方案之一是提供了一种红百合的初代诱导培养基：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L，该诱导培养基不但诱导率高，而且每个外植体新增芽数多，分化率最高，其分化率可达82.6％。