[发明专利]一种用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法在审
申请号: | 201410845465.7 | 申请日: | 2014-12-31 |
公开(公告)号: | CN104531782A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 陈可泉;王震;刘泽蒙;肖文;李艳;何珣;欧阳平凯 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12P7/40 | 分类号: | C12P7/40;C12R1/01 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 李纪昌;曹翠珍 |
地址: | 211816 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 放线 杆菌 发酵 丙酮酸 方法 | ||
1.一种用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:以产琥珀酸放线杆菌为菌株在微氧环境下发酵产丙酮酸。
2.根据权利要求1所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,配种子培养基、发酵培养基、碳源补料罐培养液;
步骤2,对发酵罐、碳源补料罐、种子培养基、发酵培养基、碳源补料罐培养液以及血清瓶进行灭菌处理;
步骤3,取灭菌后的血清瓶,接入种子培养基,通入CO2后再接入产琥珀酸放线杆菌,摇床培养后作为发酵菌种;
步骤4,在灭菌后的发酵罐接入发酵培养基,通入气体,再按照接种量体积比为3~10%接入发酵菌种后,通过调控通气量、搅拌转速、初糖浓度和补糖浓度,改变进气成分和pH调节剂,发酵30~72h得丙酮酸,发酵全程pH为6.5~7.5,温度为35~40℃。
3.根据权利要求2所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:所述步骤1的种子培养基成分包括:葡萄糖,酵母膏,玉米浆,NaHCO3,NaH2PO4·2H2O,K2HPO4·3H2O,pH 7.0;发酵培养基成分包括:葡萄糖,酵母膏,玉米浆,乙酸钠,KH2PO4,MgCl2·6H2O,CaCl2,NaCl,Na2HPO4·12H2O,NaH2PO4·2H2O,pH 7.0;碳源补料培养液:葡萄糖、蔗糖、淀粉糖化液、糖蜜或木质纤维素水解液。
4.根据权利要求2所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:所述步骤4的进气成分为空气或者CO2 和空气的混合气,所述通气量为 1~3 vvm。
5.根据权利要求4所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:所述CO2 和空气的混合气的体积比为1:5、1:3或1:1。
6.根据权利要求2所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:所述步骤4的搅拌转速为50~500 r/min,所述发酵培养基的体积为0.05~50000L。
7.根据权利要求1所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:所述产琥珀酸放线杆菌为产琥珀酸放线杆菌NJ113或产琥珀酸放线杆菌130Z。
8.根据权利要求2所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:所述pH调节剂为碳酸钠、碳酸钾、碳酸镁、氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化镁中的一种或者多种。
9.根据权利要求3所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:所述发酵培养基中糖为葡萄糖、蔗糖、淀粉糖化液、糖蜜或木质纤维素水解液中的任一种。
10.根据权利要求2所述的用放线杆菌微氧发酵产丙酮酸的方法,其特征在于:所述步骤4的初糖浓度为30~150 g/L,补糖浓度为30 g/L。
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