[发明专利]用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂及制备和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测试剂，具体地说，是一种用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，本发明还涉及该检测试剂的制备方法和检测方法。

背景技术

目前，用于上皮组织进行细胞特殊染色的方法主要有醋酸白化反应、碘试验、以及亚甲基蓝染色等。特殊染色液体外诊断疾病有很长的历史，是一种侵入式体外染色诊断方法，广泛用于上皮组织等常规病变的初筛。

醋酸白化反应是通过3％-5％乙酸溶液，涂抹在上皮组织上，等待一段时间后观察所涂抹的上皮组织有无白化反应，若有则被怀疑有肿瘤细胞，此方法特异性差，易造成假阳。碘试验是基于糖原反应，特异性同样较低。

专利CN103808551A利用虹吸法将溶液储存于棉签杆中，运输过程中溶液易渗出和氧化，使用时染色液流出缓慢，操作不便。

中国专利：2014100628449中提及调节染色液pH采用的是乙酸，我们研究发现，当乙酸的量达到3％-5％时，容易极易氧化，且pH值也下降到3左右，不符合该染色液pH5.0-6.0的要求，若乙酸含量达不到3％-5％，就无法实现醋酸白化反应，不能实现棉签染色与肿瘤组织醋酸白化反应双重定位。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的在于提供一种检测灵敏度高，检测结果可靠的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，以及提供一种全程封闭推注式，避免溶液本身特殊的腥臭味对操作者的刺激，同时减短溶液接触空气的时间，避免快速氧化造成假阳性结果，充分保证检测结果准确性的检测方法。

为解决上述技术问题，本发明提供的第一技术方案是这样的：

该用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的试剂由下述重量百分数的组分制成：0.03％-2％的亚甲基蓝、5％-10％果糖、0.1％-1％抗坏血酸、1％-5％叶酸、40％二甲基亚砜、3％-5％乙酸-乙酸钠缓冲液、0.1％-1％表面活性剂，余量为纯化水。

进一步的，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的3％-5％乙酸-乙酸钠缓冲液的pH值为5.5±0.5。

进一步的，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂，所述的表面活性剂为Tween-20。

为制备该检测试剂，本发明的另外一个技术方案是这样的：

上述用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的制备方法，依次包括下述步骤：

1)按权利要求1所述的重量百分数称取各个组分；

2)将步骤1)称取的叶酸溶入二甲基亚砜中，搅拌溶解；

3)将亚甲基蓝加入至步骤2)溶液中，搅拌溶解后继续搅拌40-80min；

4)将表面活性剂加入步骤3)溶液中，搅拌混匀；

5)将果糖和抗坏血酸和碱性水溶液加入至步骤4)溶液中再次搅拌溶解；

6)将乙酸-乙酸钠缓冲液按加入至步骤5)溶液中搅拌均匀即得。

为了更好的使用本发明，本发明还有一个技术方案是这样的：

上述用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方法，该方法检测时采用下述检测组件取样后，棉签插入杆端部插接在装有权利要求1所述的检测试剂的试剂瓶的接入管端部，倒置挤压瓶体，使检测试剂流向取样后的棉签头；

所述的检测组件包括一试剂瓶以及与试剂瓶配套使用的棉签，所述试剂瓶包括螺纹状软瓶体，瓶体上设有柱状空心接入管，所述瓶体与接入管一体成型，所述棉签包括一空心插入杆，插入杆的一端端部设有葫芦头状棉花头，所述插入杆的外径与接入管的内径相同。

作为本发明的进一步改进，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方法，所述的接入管上还设有密封接口端的瓶塞。

作为本发明的进一步改进，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方法，所述的棉签外部还设有密封棉签的包装袋。

作为本发明的进一步改进，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方法，所述的插入杆的长度160-220mm，直径3-6mm。

作为本发明的进一步改进，上述的用于上皮组织肿瘤细胞的检测试剂的检测方法，所述的棉花头尖头直径为2.5-3.5mm，下半部分直径为7-12mm，下半部分与插入杆连接。