[发明专利]利用过表达HOXA10基因制备转基因猪的方法

说明书

技术领域

本发明属于猪转基因技术领域，具体涉及一种利用过表达HOXA10基因制备转基因猪的方法。

背景技术

养猪业是畜牧业生产体系的重要组成部分，在畜牧行业中占有举足轻重的地位。对于养猪生产者来说，猪繁殖性状特别是产仔数是影响生产效益的重要因素之一。但由于产仔数性状受到受精率、排卵率、胚胎着床等多种因素的影响，同时还是低遗传力性状，遗传力仅为0.10-0.15，通过传统的选育方法进行改良，进展缓慢、收效甚微。虽然产仔数遗传改良难度大，但因其经济效益高，开发利用新的遗传改良技术尤为重要。

从上世纪80年代起，转基因技术发展迅速。在生物育种方面，相对于传统技术，使用转基因技术可使育种年限大大缩短。因此，转基因技术为提高母猪繁殖性能与遗传改良提供了新思路以及新途径。但在利用转基因技术提高母猪繁殖数性能的过程中，选择影响母猪繁殖性能的主效基因是最为关键的一环，因此对所选基因的功能鉴定则显得十分重要。

在人与小鼠中，同源异形框基因HOXA10(Homobox10)已被多次报道与子宫内膜容受性(Taylor HS et al.,HOX gene expression is altered in the endometrium of women with endometriosis.Hum.Reprod 1999,14(5):1328-1331；Bagot CN et al.,:Maternal Hoxa10is required for pinopod formation in the development of mouse uterine receptivity to embryo implantation.Developmental Dynamics 2001,222,(3):538–544)、胚胎附植(Taylor HS:The role of HOX genes in human implantation.Hum.Reprod,2000,6(1):75-79；Hyunjung Lim et al.,Hoxa-10Regulates Uterine Stromal Cell Responsiveness to Progesterone during Implantation and Decidualization in the Mouse.Molecular Endocrinology June 1999,13(6):1005-1017)和胚胎发育(Leo F et al.,：Regulation of tryptophan 2,3-dioxygenase by HOXA10enhances embryo viability through serotonin signaling.Endocrinology and Metabolim 2011,300(1):86-93)等繁殖性状相关。本实验室对该基因的部分功能进行了相关研究，发现HOXA10基因在猪(Genebank登录号为JN836599)与人(GenBank登录号为NM_018951)和小鼠(GenBank登录号为NM_008263)中高度保守，并且猪HOXA10基因的表达与母猪子宫内膜的功能相关；同时通过孕激素处理妊娠小鼠，发现HOXA10基因表达量上调时，小鼠的胚胎着床数上升，验证了HOXA10基因对胎附植具有重要作用(Wu D et al.,Molecular characterization and identification of the E2/P4response element in the porcine HOXA10gene.Mol Cell Bio chem 2013,374:213-222)。因而，猪HOXA10作为与繁殖性状密切相关的候选基因，构建转HOXA10基因猪模型，从个体水平上进一步研究其作用机理并用于提高猪繁殖性能显得十分必要。

发明内容