[发明专利]一种核酸适配体/纳米金修饰固相微萃取石英毛细管的制备方法

权利要求书

1.一种核酸适配体/纳米金修饰石英毛细管的制备方法，其步骤依次如下：

(1)采用柠檬酸钠还原法制备得纳米金胶体溶液；

(2)对石英毛细管内表面进行食人鱼碱洗及活化处理，然后采用氨基硅烷化试剂进行硅烷化处理；

(3)取所述纳米金胶体溶液，使其流经步骤(2)硅烷化后所得的石英毛细管，悬停后在石英毛细管内表面涂渍纳米金粒子，反应后取出石英毛细管，去离子水冲洗干净，通氮气除氧；

(4)取二硫代乙二醇溶液，使其流经步骤(3)所得的纳米金单次修饰的石英毛细管，在纳米金粒子表面修饰巯基；

(5)取所述纳米金胶体溶液，使其流经步骤(4)巯基处理后所得的石英毛细管，悬停后通过巯金键使纳米金粒子再次修饰所述石英毛细管的内表面，室温下键合反应后，用蒸馏水清洗，氮气吹干；

(6)取核酸适配体溶液通过步骤(5)处理后所得的石英毛细管，室温下键合反应后，用缓冲液清洗，氮气吹干，低温保存。

2.如权利要求1所述的核酸适配体/纳米金修饰石英毛细管的制备方法，其特征在于：石英毛细管内表面第一次化学键合修饰纳米金粒子后，经过二硫代乙二醇溶液改性再进行第二次纳米金粒子化学键合修饰。

3.如权利要求1所述的核酸适配体/纳米金修饰石英毛细管的制备方法，其特征在于：所述步骤(6)的核酸适配体选用三(2-氯乙基)磷酸酯活化处理巯基修饰。

4.如权利要求1所述的核酸适配体/纳米金修饰石英毛细管的制备方法，其特征在于：所述核酸适配体溶液浓度为0.205μmol/L，适配体键合时间为72h。

5.如权利要求1所述的核酸适配体/纳米金修饰石英毛细管的制备方法，其特征在于，所述核酸适配体键合条件：核酸适配体键合缓冲液为Tris-HCl缓冲液(20mmol/L tris-HCl,pH＝7.4)，适配体键合时间为72小时。

6.如权利要求1所述的核酸适配体/纳米金修饰石英毛细管的制备方法，其特征在于：石英毛细管内表面化学处理方法：60℃条件下用30％H₂O₂-H₂SO_4(浓)(1:4,V/V)溶液流动式清洗1.5小时。