[实用新型]一种结构光照明光学系统有效
申请号: | 201420049633.7 | 申请日: | 2014-01-26 |
公开(公告)号: | CN203732796U | 公开(公告)日: | 2014-07-23 |
发明(设计)人: | 熊大曦;杨西斌 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
主分类号: | G02B21/06 | 分类号: | G02B21/06 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 董建林 |
地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 结构 照明 光学系统 | ||
技术领域
本实用新型涉及一种超分辨率显微成像技术中新型的结构光照明光学系统,具体的说是指一种基于复眼透镜阵列的结构光照明显微镜成像光学系统,属于光学成像技术领域。
背景技术
普通光学显微镜受光学衍射极限的限制,横向分辨率一般只能达到200nm,纵向分辨率约500nm,难以满足当前生物学领域对亚细胞结构和分子结构的研究需求。
结构光成像技术最初是由Neil等人于1997年首次提出的,并将之应用于生物学成像,分辨率可以达到100nm。该技术使用特殊调制的结构光场照明样品,通过运用相移算法从不同相位的调制图像数据中提取聚焦平面的信息,得到结构光照明显微成像的图像数据,与目前已有的几种超分辨光学显微成像方法,如光激活定位法(PALM)、随机光学重构法(STORM)以及受激发射损耗法(STED)等相比,具有成像速度较快,结构简单,适合于活体组织实时观察等优点。
结构光照明显微最早是通过将照明光路中加入一个正弦光栅来实现的,光栅图案被投影到样品上形成结构光照明,光栅加装在一个压电陶瓷上通过压电陶瓷控制器实现步进,每次移动光栅周期的1/3,相当于光栅图案相移2π/3。三次相移(0,2π/3,4π/3)得到样品的三幅源图像,通过一个简单的算法,可以得到样品的层析图像;而通过另外一个算法,则可以将与光栅条纹垂直方向上的横向空间分辨率提高一倍。在这些用光栅获得结构光照明的系统中,必须移动光栅来获得不同相移下的源图像,因此这种机械移动装置会减低系统的稳定性。
图1为传统的结构光照明显微成像系统工作原理图。
如图1所示:目前结构中采用光栅的结构光照明显微成像系统的光路主要由光栅、照明光源、透镜系统、CCD以及同步控制系统组成。光源发出的光经过准直,经光栅产生结构光,照明待测物体表面,透镜系统将物体表面发出的荧光成像于CCD平面上。利用压电装置使得光栅的移动(对应于相位移动)与CCD记录图像的速度同步,即一幅图像记录完成后,光栅移动一个位移,记录新位相对应的图像。将记录的图像利用特定算法进行重构,得到层析图像以及超高分辨率的二维图像。这类光路,结构简单、成像速度快。但是,存在移动过程中位相的精度、同步过程中时间精度、信噪比低等问题。
实用新型专利200810071654.8提出了一种基于二维调制技术的切层图像获取方法,该方法利用二维空间光调制器如数字微镜片DMD、穿透式液晶LCD、反射式硅基液晶LCOS等代替传统结构光显微镜中的光栅,对照明进行二维调制,从而产生一维不同相位的调制图案。实用新型专利201110448980.8提出了一种基于数字微镜器件的高速结构照明光学显微系统及方法,实现了高速成像和高光能量利用率。但是空间光调制器存在成本高、成像速度仍然受到限制、系统体积大等缺点。目前为止,所有涉及结构光照明显微的技术,主要是基于以上两种方式。
实用新型内容
为解决现有技术的不足,本实用新型的目的在于提供一种通过LED芯片的电控发光,实现结构光条纹的ns级切换速度,获得高速结构光显微成像能力的结构光照明光学系统。
为达到上述目的,本实用新型是通过以下的技术方案来实现的:
一种结构光照明光学系统,其特征在于,包括:
具有多个芯片结构的LED激发光源;
与LED激发光源连通且独立控制每个芯片的亮暗、进而控制整个LED激发光源形成亮暗条纹光的计算机;
位于亮暗条纹光的发射光路上的中继透镜组;
包括多个复眼透镜单元,且每个复眼透镜单元均接收透过中继透镜组的亮暗条纹光以对LED激发光源的多个芯片结构进行成像,从而在中间像面上形成数目倍增的结构光条纹的复眼透镜阵列;
用于反射结构光条纹的中间像面;
位于结构光条纹发射光路上的用于透射结构光条纹的二向色镜;
接收透过二向色镜的结构光条纹并将其按照一定倍率放大后投影的投影物镜;
设置于载物台上,接收投影物镜投影的结构光条纹后形成结构光照明并激发产生荧光的照明靶面;
位于所述的荧光经二向色镜反射后的光路上,用于透射所述荧光的筒镜;
用于对透过筒镜的荧光进行滤光的窄带滤光片;
用于接收所述荧光的光电探测器。
进一步,还包括一同步控制系统,所述的同步控制系统分别与所述的计算机和LED激发光源连通。
且所述的LED激发光源与中间像面、中间像面与照明靶面、照明靶面与光电探测器成像面均处于共轭结构位置。
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