[实用新型]一种胸苷酸合成酶基因表达检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测试剂盒，尤其是涉及一种胸苷酸合成酶基因表达检测试剂盒。

背景技术

胸苷酸合成酶（Thymidylate synthase,TS）是由两个相同亚单位组成的二聚体蛋白,相对分子质量为72kDa,是DNA合成的关键酶,它催化脱氧尿苷酸甲基化,使之转变为脱氧胸苷酸。TS在DNA合成与修复、细胞增殖与分化中有十分重要的作用,是肿瘤化疗药5-Fu和甲氨蝶呤等重要靶酶。

氟类药物包括5-氟尿嘧啶（5-FU）、替加氟、卡莫氟、氟尿苷、脱氧氟尿苷以及卡培他滨等。该类药物为尿嘧啶的氟代衍生物，在体内转化为5-氟尿嘧啶脱氧核苷酸（5F-dUMP）后，可抑制胸苷酸合成酶（TS），阻止脱氧尿苷酸（dUMP）甲基化为脱氧胸苷酸（dTMP），从而抑制DNA合成。在生理情况下，TS表达的调节依赖于细胞周期和细胞增殖状态。在同步细胞中，当细胞从G0期进入到S期，TS活性水平增加约20倍。研究显示TS的高表达与这些药物的抗药性以及乳腺癌、胃癌和结直肠癌等肿瘤的预后差相关。

多种肿瘤的临床研究均显示TS mRNA表达水平与5-FU疗效密切相关，例如：结直肠癌、肺癌、乳腺癌、头颈鳞状细胞癌等。临床研究表明，低TS mRNA水平的肿瘤患者接受氟类化疗的效果较好，中位生存期较长。反之，TS高表达的患者接受氟类治疗疗效较差。因此，检测TS mRNA的表达水平对于肿瘤患者的治疗和预后有着重要意义。

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题是提供一种胸苷酸合成酶基因表达检测试剂盒，该试剂盒在检测胸苷酸合成酶基因表达时具有敏感性高、特异性强、耗时短等优点，并且在运输途中，试剂盒内部的容器不易破损。

为了解决上述技术问题，本实用新型提供一种胸苷酸合成酶基因表达检测试剂盒，包括盒体、设置在盒体内的固定座和盒盖，在固定座上分别设置有放置去离子水试剂瓶、扩增引物管、白蛋白内参引物管、SYBR premix ExTaq(含ROX)管的孔，所述孔包括比放置在内部的容器直径大的折痕线和沿径向设置的切口，所述孔的开口要小于放置在内部的容器的直径，在所述盒盖内侧面上设置有防震用的软性材料。

所述孔的大小根据去离子水试剂瓶、扩增引物管、白蛋白内参引物管、SYBR premix Ex Taq管的大小而设置。

所述扩增引物为特异性扩增TS的引物，上游引物序列为5′-TTTGGAGGAGTTGCTGTGGTT-3′；下游引物序列为5′-GATCCATTGGCATCCCAGAT-3′；所述白蛋白内参引物上游引物序列为5′-TTCTACAATGAGCTGCGTGTG-3′，下游引物序列为：5′-CAGCCTGGATAGCAACGTACA-3′。引物包括扩增引物和白蛋白内参引物，引物浓度为100pmol/L。

本实用新型与现有产品相比，具有如下积极有益的效果：

本试剂盒结构简单、设计合理、使用方便、制造容易、检测过程不易受污染；本试剂盒在检测一种胸苷酸合成酶基因表达时具有敏感性高、特异性强、耗时短等优点。并且在运输途中，由于试剂盒中的容器都被孔卡住，不易左右晃动，而盒盖内表面上设置的软性材料可以保护容器上下表面，从而保证了试剂盒内部的容器的安全。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本实用新型进行进一步说明。

图1为本实用新型的整体结构示意图。

图2为本实用新型的固定座的俯视图。

具体实施方式

如图1所示，本实用新型的一个实施例为一种胸苷酸合成酶基因表达检测试剂盒，包括盒体1、固定座2、盒盖3、在固定座2上设有孔8，其孔8中分别放置去离子水试剂瓶4、扩增引物管5、白蛋白内参引物管6、SYBRpremix Ex Taq管7。容器孔的大小根据去离子水试剂瓶4、扩增引物管5、白蛋白内参引物管6、SYBR premix Ex Taq管7的大小而变化。孔8的开口小于其中放置的容器的直径，当容器插入到孔8中时，孔8沿切口82打开，沿折痕线81向下弯折，从而将容器包裹住，使其不易左右晃动。盒盖3的内表面上还设置有软性材料，当盖上盒盖3时，软性材料与盒体1内部的容器的上表面压紧接触，使容器也不能上下移动，使用软性材料能够起到一定的防震作用。