[实用新型]植物胞间液蛋白制备与浓缩复合管

说明书

技术领域

本实用新型涉及植物胞间液蛋白解析研究用装置，尤其是涉及一种植物胞间液蛋白制备与浓缩复合管。

背景技术

在植物科学研究中，植物胞间液中蛋白的成分、功能等逐渐成为新的研究热点。胞间液又称细胞间液，是指细胞之间的液体物质，其组分及其行使的功能有别于胞内液，亦称之为分泌液（secretion）。植物胞间液中的蛋白成分在植物生长发育和抗病抗逆反应及其信号传导过程中发挥着重要作用。目前，国内外众多实验室，利用超滤、高效液相、(双向)电泳及生物质普等蛋白质组学工具，对各种植物胞间液蛋白成分进行分离、纯化、同源序列解析，以期探索植物胞间液各种蛋白成分的生物学功能。

由于植物胞间液中蛋白含量较低，植物胞间液的制备和其中蛋白成分的浓缩是上述领域工作的关键步骤。早前的研究中，人们一般采用伤流等较粗糙的手段进行收集和制备。该方法用时较长，且容易因组织中细胞损伤受到胞内成分的污染。近年来，对植株的叶片及茎段胞间液的提取通常使用注射器与离心管的结合，通过离心利用注射器底部的小孔将胞间液收集在注射器外套的离心管中，完成植物胞间液的制备，再通过冷冻、沉淀或超滤等方法进行蛋白浓缩。这种方法通过对离心机转速的控制，可以最大程度的避免胞内液对胞间液的污染。但是，此种方法仍存在着以下不足：1、该收集方法操作相对繁杂，而且操作不简便。2、操作时间相对较长。由于该方法是在植物胞间液收集以后再进行超滤，时间过长会造成胞间液量或质的改变，特别是胞间液中的蛋白很容易降解，对蛋白的相关分析带来了扰动。

发明内容

本实用新型的目的在于提供一种操作简单、集制备与浓缩于一体的植物胞间液蛋白制备与浓缩复合管。

为实现上述目的，本实用新型可采取下述技术方案：

本实用新型所述的植物胞间液蛋白制备与浓缩复合管，它是由自外至内依次叠套在一起的大离心管、中离心管和小离心管组成，在所述大离心管管口部位的外侧壁上开设有外螺纹，其上旋拧有密封压盖；所述中离心管和小离心管的弧形底面上均布有通孔，在所述小离心管的底部铺设有滤膜，在所述中离心管的底部铺设有超滤膜。

均布在所述中离心管和小离心管弧形底面上的通孔直径为1mm。

所述滤膜的孔径小于高等植物细胞的最小直径，所述超滤膜的孔径与待截留的蛋白分子量大小相适应。

本实用新型的优点在于结构简单，组装、操作简便，方便实用。叠套在一起的三个离心管与离心机配合使用，集植物胞间液蛋白制备和浓缩于一体，简化了操作步骤，可在短时间内获得较高纯度和浓度的植物胞间液蛋白，不但降低了胞内蛋白的污染，而且最大程度的减少了胞间液蛋白的降解，提高了植物胞间液蛋白收集和浓缩的工作效率和精度，大大降低了对后续实验结果的扰动。

附图说明

图1是本实用新型的结构示意图。

具体实施方式

如图1所示，本实用新型所述的植物胞间液蛋白制备与浓缩复合管，它是由自外至内依次叠套在一起的大离心管1、中离心管2和小离心管3组成，在大离心管1管口部位的外侧壁上开设有外螺纹，其上旋拧有密封压盖4；中离心管2和小离心管3的弧形底面上均匀开设有直径1mm的通孔，在小离心管3的底部铺设有滤膜5，在中离心管2的底部铺设有超滤膜6。实际制造时，滤膜5的孔径小于高等植物细胞的最小直径（一般选择孔径＜10μm即可），超滤膜6的孔径与待截留的蛋白分子量大小相适应，如可以选择10kDa。

使用时，首先在小离心管3底部铺设滤膜5，在中离心管2底部铺设超滤膜6，然后将中离心管套装在大离心管1内，将小离心管3套装在中离心管2内。

将植物的茎（或叶片、根）用一定浓度的磷酸缓冲液清洗，再用常规的真空负压仪进行负压处理20分钟后放入小离心管3中，盖上密封压盖4，放入离心机中进行分离。

在离心力的作用下，含有蛋白的胞间液从小离心管3流入中离心管2中，组织残渣和细胞碎片在滤膜5的阻隔下，留在小离心管3内；同样，在离心力的作用下，胞间液通过中离心管2流入大离心管1中，其中的蛋白被铺设在中离心管2底部的超滤膜6截留，即为浓缩的较高纯度、较高含量的蛋白样品。