[实用新型]一种带有显微镜镜检浮载液的线虫玻片有效

专利信息
申请号: 201420588396.1 申请日: 2014-10-13
公开(公告)号: CN204255726U 公开(公告)日: 2015-04-08
发明(设计)人: 边勇;刘若思;郑春生;汪万春;高文娜;吕玉峰;江丽辉 申请(专利权)人: 中华人民共和国北京出入境检验检疫局
主分类号: G01N1/30 分类号: G01N1/30
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地址: 100026*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 带有 显微镜 镜检浮载液 线虫
【说明书】:

技术领域

实用新型涉及利用显微镜对线虫等微小动物进行观察、鉴定、拍照的技术领域,具体为一种带有显微镜镜检浮载液的线虫玻片。

背景技术

线虫(nematode)是一种低等无脊椎动物,广泛分布于陆地、海洋和湖泊之中。据保守估计,全世界线虫种类超过50万种,线虫中的一些种类具有寄生性,按照寄主种类可分为动物寄生类和植物寄生类。线虫通过其对寄主的危害,从而引起经济损失,有些种类则直接危害人类。长期以来,线虫学家致力于对线虫危害的机理机制和防治措施进行研究,而对线虫进行分类鉴定是研究其致病机理的基础。目前在线虫分类鉴定领域使用的线虫鉴定方法主要有形态学鉴定方法和分子生物学鉴定方法,虽然近些年来分子生物学的蓬勃发展使线虫分类鉴定进入了新的层次,但由于分子鉴定发展历史还不长,其鉴定体系尚未完善,同时分子生物学鉴定需要的技术要求较高,需要特定的仪器设备才能开展。因此可预见的一段时期内,利用显微镜等简单仪器进行的形态学鉴定依然是线虫分类鉴定的主要技术手段。线虫研究工作中,在利用显微镜进行线虫分类鉴定时,一般是将线虫虫体置放于载玻片中央的浮载液中,加盖盖玻片后进行显微镜镜检观察。线虫玻片制作作为最经典实验技术之一,对线虫形态结构观察、各种数据的测量及分类鉴定,尤其对鉴定的新种更为重要。如果玻片效果不佳,则后续得到的结果可信度将大打折扣,因此制作好的线虫玻片是进行传统的以形态特征为基础的分类和鉴定研究的前提条件。线虫镜检观察的要点是各种微小特征机构,包括消化系统、生殖系统和体表系统的各结构形状、大小、数量等,其中部分结构特征大小仅2μm-10μm,观察时受到显微镜分辨率和样品自身结构的影响,观察较为困难,从而影响鉴定的准确性。解决的办法通常是提高显微镜的分辨率及降低样品自身结构的影响两种途径。

实用新型内容

本实用新型主要是提供一种带有显微镜镜检浮载液的线虫玻片,通过提高显微镜的分辨率及降低样品自身结构的影响从而综合改善鉴定中对线虫细微特征的观察效果。

为达到上述目的,本实用新型的技术方案是这样实现的:

一种带有显微镜镜检浮载液的线虫玻片,它包括载玻片、盖玻片,所述载玻片上滴加有折射率为1.35~1.45的浮载液,所述浮载液PH值为7.5~10,所述盖玻片加盖于所述载玻片上,所述载玻片和盖玻片使用凡士林封闭其四周;

由于相比蒸馏水作为镜检介质的浮载液的折射率更高且更接近线虫虫体自身的折射率,增加显微镜的分辨率和线虫虫体的透明度,由于所载浮载液的渗透,提高了虫体的膨胀度,改善了对线虫细微特征的观察效果。

附图说明

图1为本实用新型一种带有显微镜镜检浮载液的线虫玻片的示意图。

附图中各标记如下:1、载玻片,2、盖玻片,3、浮载液。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本实用新型进行进一步的详细说明。

实施例一:

按照蒸馏水∶二甲基亚砜∶三乙醇胺∶体积百分浓度40%的甲醛溶液∶体积百分浓度96%的酒精∶甘油按体积比50∶(0.1~1)∶(1~10)∶(0.1~1)∶(1~10)∶(1~20)配置浮载液,分别量取无菌蒸馏水50mL,二甲基亚砜溶液0.1ml,氢氧化钾20mg,三乙醇胺1mL,甘油20mL,96%体积浓度百分比的酒精1mL,40%体积浓度百分比的甲醛溶液1mL,将50ml无菌蒸馏水倒入100ml烧杯,放置于加热板上,60℃保持5分钟;向以上蒸馏水中加入0.1mL二甲基亚砜溶液,搅拌溶解。继续加入1mL三乙醇胺,搅拌至全部溶解;将量取的甘油逐步加入,由于甘油折射率高达1.48,甘油的添加将改变前述溶液的折射率,控制甘油加入量,控制浮载液折射率在1.35~1.45之间,逐步向加有二甲基亚砜的蒸馏水中加入所称量的氢氧化钾,并不断搅拌,通过控制浮载液中氢氧化钾浓度,调节浮载液PH值使之在7.5~10之间。将溶液在加热板上保温10分钟后,关闭加热板,自然冷却30分钟;向冷却后的溶液中加入1mL体积百分浓度96%的乙醇溶液,1mL体积百分浓度40%的甲醛溶液;得到线虫显微镜镜检浮载液。将1μL线虫显微镜镜检浮载剂3滴加于载玻片1中央,挑取线虫若干条,置于载玻片1上线虫显微镜镜检浮载液3中,加盖盖玻片2,使用凡士林封闭载玻片1和盖玻片2四周。

实施例二:

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