[实用新型]一种B型利钠肽免疫层析半定量检测试纸

说明书

技术领域

本发明创造属于人B型利钠肽检测领域，特别涉及一种采用胶体金免疫层析法对人B型利钠肽进行半定量检测的试纸。

背景技术

B型利钠肽又称脑尿钠肽(Brain natriuretic peptide，BNP)，是由心肌细胞合成的具有生物学活性的天然激素，主要在心室表达，同时也存在于脑组织中。当左心室功能不全时，由于心肌扩张而快速合成释放入血，有助于调节心脏功能。心脏功能受损时，BNP不仅分泌的速度快、数量大，而且对血容量、心脏功能调节发挥重要作用，因此，有人称BNP为“心脏负荷应急救援分子”。将BNP作为心力衰竭的血浆标志物，能够用于心力衰竭的诊断、严重程度的判断、治疗、预后评估，指导正确、有效地治疗心衰。心肌细胞所分泌的BNP先以108个氨基酸组成的前体形式存在，当心肌细胞受到刺激时，在活化酶的作用下裂解为由76个氨基酸组成的无活性的直线多肽和32个氨基酸组成的活性环状多肽，释放入血循环，分别被称为NT-proBNP和BNP。BNP小于100pg/ml可排除心衰。

BNP和NT-proBNP检测在本世纪初先后进入我国，十年来已经为各级医院和医师广泛用于临床实践，成为心血管病尤其是心力衰竭诊断十分有用的生物标志物。我国2007年《慢性心力衰竭诊断治疗指南》和2010年《急性性心力衰竭诊断治疗指南》也推荐将NT-proBNP和BNP用于心衰的诊断和预后判断。

目前临床上用于BNP测定的方法以酶联免疫法居多。该方法检测快速，敏感性高，试剂为液体，即开即用，使用方便，开瓶后有效期较长；缺点是试剂一般只能配合专门仪器来使用，费用较高，不利于基层医院开展此项检测。

免疫胶体金技术是20世纪70年代初期Faulk和Taylor始创，最初用于免疫电镜技术。胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂，于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术，现在已成功用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断制剂的制造等领域。目前金标记技术常与膜载体配合，形成特定的免疫检测方式，如免疫渗滤试验和免疫层析试验等。免疫层析试纸条就是此技术用于体外快速诊测方式的一个重要发展方向，是在现代单克隆抗体技术、胶体金免疫层析技术和新材料技术基础上发展起来的新型检测技术。近年来该技术发展迅速，已经在临床诊断特别是床边检测(POCT)中的到了广泛应用，如传染病、早孕、癌症等的检测。免疫胶体金技术与ELISA技术同属于免疫学诊断方法，均是依赖于抗原与抗体的特异性反应，但不需要专门的仪器设备，更适于现场及床旁快速检测。

对于床旁检测(Point ofCare testing，POCT)测定BNP而言，因其方便快速地提供可靠的检验结果，能帮助医生更早制订治疗策略并节省治疗费用；作为中心实验室的扩展，能够增加检测能力并减轻实验室检验人员的压力；管理人员也能更合理地使用资源。2008ESC心衰诊断治疗指南中表明就诊时测定BNP浓度低于100ng/L，则该患者慢性心 衰的可能性很小(“排除”截点)；测定BNP浓度高于400ng/L，则该患者慢性心衰的可能较大(“诊断”截点)。如检测值介于上述两截点之间(“灰区”)，可能是程度较轻的慢性心衰或其他，此时应结合其它检查结果进行进一步的鉴别诊断。

目前虽然有一些试剂厂商开发出了检测下限为5μg/L，但是都需要配合大型仪器才能进行检测，费时、费力且价格昂贵。且市场上专门针对100ng/L～400ng/L这一临界范围的快速检测产品尚属空白。因此急需一种能够对血浆中BNP进行半定量检测的胶体金试纸，提供断病依据，以帮助医务工作人员及时准确的掌握患者病情，降低医疗风险和成本。

发明内容

本发明创造提供一种B型利钠肽免疫层析半定量检测试纸，能够高效快速、并且准确半定量地对BNP进行实时检测，具有十分重要的经济和社会价值。

为解决上述技术问题，本发明创造采用的技术方案是，包括硝酸纤维素NC膜，在所述硝酸纤维素NC膜一端依次向上搭接有胶体金垫、样品垫，在所述硝酸纤维素NC膜另一端向上搭接有吸水纸，所述胶体金垫上含有BNP标记抗体以及兔IgG标记抗体，所述硝酸纤维素NC膜在沿液体层析方向上依次包被有检测线(T线)、参比线(R线)以及质控线(C线)，所述检测线为与所述BNP标记抗体配对的BNP抗体，所述参比线为羊抗兔二抗，所述质控线为羊抗鼠二抗。

其中，所述BNP标记抗体为胶体金标记的鼠抗人BNP单克隆抗体，检测线上与其配对的BNP抗体也为鼠抗人BNP单克隆抗体，二者分别识别BNP不同的表位，所述兔IgG标记抗体为胶体金标记的兔IgG抗体。