[发明专利]选择性Nox1抑制剂肽及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及用于预防和/或治疗与NADPH氧化酶1(Nox1)活性和/或活性氧簇(reactive oxygen species)(ROS)产生增加相关的病理学病症和疾病的新型肽、组合物和方法。因此，所述新型肽特别适用于治疗和/或预防癌症、动脉粥样硬化、血管发生和衰老。

背景技术

Nox1在生理条件下和一些病理学病症中生成ROS。已知ROS在生物体内导致损伤，因此与许多不同的病症相关。还已知NADPH氧化酶为氧化应激的来源，其导致了许多病症的病因。已知Nox1的表达与许多不同的病症(包括癌症)相关。

没有毒性的治疗选择性显然对治疗剂而言是重要的。具体而言，在癌症治疗中，优先杀死癌症细胞而对正常细胞没有毒性是最重要的考虑因素之一。

在本发明之前，已鉴定了若干NADPH氧化酶(Nox)的抑制剂，但是迄今为止尚未开发出特异性的Nox抑制剂。

还已经测试了若干可穿透细胞的肽抑制剂，例如gp91ds-tat肽、PR-39，以及Rac肽抑制剂。gp91ds-tat肽被设计为通过模拟Nox2序列来特异性抑制Nox2，所述Nox2序列被认为对与p47phox的相互作用而言是重要的。但是，由于所述肽靶向的区域在其他Nox同工型中是同源的，因此，所述肽缺少特异性。此外，所述肽是低效抑制剂，其在50mM时抑制嗜中性粒细胞的ROS生成达25％。

最近，GenKyoTex公司使用吡唑并-吡啶并-二氮杂卓、-吡嗪和-噁嗪二酮衍生物开发了更特异性的Nox抑制剂，其具体靶向Nox1和Nox4酶。GenKyoTex目前正在使用小分子GKT137831进行I期临床试验，用于治疗糖尿病肾病。还进行了临床前试验用于治疗糖尿病肾病、动脉粥样硬化、特发性肺纤维化、肝纤维化和血管发生的模型。但是，尽管GKT137831是特异性针对Nox1/Nox4的，但其也对Nox2、Nox3和Nox5表现出亲和性，因此具有低选择性。

其他化合物已被使用多年，包括夹竹桃麻素(apocynin)、二亚苯基碘鎓(DPI)、4-(2-氨基乙基)-苯磺酰氟盐酸盐(AEBSF)和新蝶呤。

夹竹桃麻素是从胡黄连(Picrorhiza kurroa)中提取的，其能够阻止活性氧化酶复合体的形成。但是，夹竹桃麻素的抑制作用是有争议的。实际上，已证明夹竹桃麻素并非特异性针对NADPH氧化酶，而是影响其他事件，例如血栓素A2形成和AP-1转录因子的诱导，并且夹竹桃麻素是抗氧化剂而非Nox抑制剂。

二亚苯基碘鎓(DPI)是所有黄素酶的非特异性抑制剂，因此能够抑制Nox酶，但是也能够抑制黄嘌呤氧化酶和细胞色素P450酶。除了是非选择性的，还已经证明DPI具有毒性。它还是乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶以及内部Ca²⁺泵的抑制剂，除了其固有的毒性之外这也引起了对其应用的主要忧虑。

已证明氨基乙基-苯磺酰氟(AEBSF)阻止黄素细胞色素b₅₅₈与p47^phox结合、NADPH氧化酶的激活以及巨噬细胞中O·-₂产生的激发。但是AEBSF主要是丝氨酸蛋白酶抑制剂；因此它能够以更高效率抑制蛋白酶(例如糜蛋白酶、激肽释放酶、纤溶酶、凝血酶和胰蛋白酶)，并具有许多其他作用。

已证明一些其他非特异性分子——其被误导性地命名为间接Nox抑制剂——干扰影响Nox酶的上游信号转导通路。这些分子包括抑制Nox酶的PDGF-依赖性Src激活的硫代三唑并嘧啶化合物VAS2870、血管紧张素转化酶抑制剂(ACE抑制剂)、Ang II受体阻断剂(ARB)、磷酸二酯酶、类花生酸、皮质类固醇、MAP激酶、蛋白激酶C的抑制剂(例如苯并(b)吡喃-4-酮衍生物，Shionogi Pharma的S17834)。

还有越来越多对使用针对Nox酶的siRNA方法的报道。具体而言，已经开发一些RNAi来降低Nox1表达。但是，使用RNAi作为人类的治疗干预仍处于初级阶段，并且可能需要数年时间来优化。不幸的是，仅真正测试了少量siRNA对Nox同工型的特异性。没有任何令人满意的用于选择性抑制Nox，特别是Nox1的siRNA方法。