[发明专利]包含NADPH依赖性酶的重组微生物及其生产方法有效

申请号：	201480006822.9	申请日：	2014-01-30
公开（公告）号：	CN104955938B	公开（公告）日：	2018-03-02
发明（设计）人：	A·米勒;M·科普克	申请（专利权）人：	朗泽科技新西兰有限公司
主分类号：	C12N1/21	分类号：	C12N1/21;C12N9/02
代理公司：	北京北翔知识产权代理有限公司11285	代理人：	孙占华,张广育
地址：	新西兰奥***	国省代码：	暂无信息
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摘要：
搜索关键词：	包含 nadph 依赖性重组微生物及其生产方法
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【权利要求书】：

1.一种重组一氧化碳营养梭菌微生物，其适于表达至少一种外源烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)-依赖性酶。

2.权利要求1所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述NADPH-依赖性酶选自氢化酶、甲酸盐脱氢酶、亚甲基-四氢叶酸(THF)-脱氢酶、羟甲基戊二酸(HMG)-CoA还原酶、3-羟基丁酰-CoA脱氢酶、乙酰乙酰-CoA还原酶、反式-2-烯酰-CoA还原酶、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)共依赖酶或NADH/NADPH分支酶。

3.权利要求2所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述氢化酶是分支烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)仅仅Fe氢化酶。

4.权利要求2所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述甲酸盐脱氢酶是分支NADP甲酸盐脱氢酶。

5.权利要求2所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述乙酰乙酰-CoA还原酶是phaB(EC 1.1.1.36)。

6.权利要求5所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述微生物还包括外源3-羟基丁酰-CoA脱水酶是phaJ(EC 4.2.1.119)。

7.权利要求5所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述微生物还包括外源NADH依赖性3-羟基丁酰-CoA脱氢酶是hbd(EC 1.1.1.157)。

8.权利要求2所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述反式-2-烯酰-CoA还原酶是巴豆酰-CoA还原酶。

9.权利要求8所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述巴豆酰-CoA还原酶是ccr(EC 1.3.1.86)或ccr_Rs(EC 1.3.1.85)。

10.权利要求9所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述微生物还包括外源NADH依赖性巴豆酰-CoA还原酶ter(EC 1.3.1.44)。

11.权利要求1所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中微生物的NADPH的利用相对于亲代微生物增加。

12.权利要求1所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中微生物的至少一种发酵产物的生产相对于亲代微生物增加。

13.权利要求1所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述NADPH依赖性酶的NADH-依赖性同种型相对于亲代微生物减弱或敲除。

14.权利要求1所述的重组一氧化碳营养梭菌微生物，其中所述微生物源自选自下述的亲代微生物：自产乙醇梭菌、杨氏梭菌、拉氏梭菌、食一氧化碳梭菌、德氏梭菌、臭味梭菌、乙酸梭菌、甲酸乙酸梭菌和大梭菌。