[发明专利]从生物组织分离细胞的方法在审
| 申请号： | 201480008087.5 | 申请日： | 2014-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN105008519A | 公开（公告）日： | 2015-10-28 |
| 发明（设计）人： | 后藤昌史;村山和隆;山形洋平;渡边君子 | 申请（专利权）人： | 国立大学法人东北大学;明治制果药业株式会社;国立大学法人东京农工大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N1/00;C12N5/07 |
| 代理公司： | 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 | 代理人： | 侯婧;张广育 |
| 地址： | 日本宫城*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生物 组织 分离 细胞 方法 | ||
1.一种从生物组织分离细胞的方法，
其特征在于，使用分解酶组合物，所述分解酶组合物通过在一定量的中性蛋白酶和/或来自梭菌属(Clostridium.sp)的蛋白酶中，根据所述生物组织的主要蛋白质的组成，加入该主要蛋白质的分解酶用量而形成。
2.根据权利要求1所述的方法，其包括：
决定所述生物组织的主要蛋白质的组成的步骤；
在一定量的中性蛋白酶和/或来自梭菌属(Clostridium.sp)的蛋白酶中，根据决定的组成加入所述主要蛋白质的分解酶的用量，从而调制分解酶组合物的步骤；和
利用调制后的分解酶组合物处理所述生物组织的步骤。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述主要蛋白质的分解酶为梭菌属(Clostridium.sp)的胶原酶H和/或胶原酶G。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述主要蛋白质为胶原蛋白I和/或胶原蛋白III。
5.根据权利要求4所述的方法，其中根据胶原蛋白I和/或胶原蛋白III的组成，决定在所述分解酶组合物中加入的所述胶原酶H和/或所述胶原酶G的量的比率。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述中性蛋白酶为嗜热菌蛋白酶或梭菌属(Clostridium.sp)中性蛋白酶。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述来自梭菌属(Clostridium.sp)的蛋白酶为具有α-N-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)分解活性的蛋白酶。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，通过酶免疫定量法决定所述生物组织的蛋白质的组成。
9.一种从胰脏组织分离胰岛的方法，
其特征在于，使用分解酶组合物，所述分解酶组合物通过在一定量的中性蛋白酶和/或来自梭菌属(Clostridium.sp)的蛋白酶中，根据所述胰脏组织的胶原蛋白I和/或胶原蛋白III的组成，加入胶原蛋白I和/或胶原蛋白III分解量的梭菌属(Clostridium.sp)胶原酶H和/或胶原酶G而形成。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述分解酶组合物包含作为所述中性蛋白酶的梭菌属(Clostridium.sp)中性蛋白酶和作为所述来自梭菌属(Clostridium.sp)的蛋白酶的具有α-N-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯盐酸盐(BAEE)分解活性的蛋白酶。
11.一种从肝脏组织分离肝细胞的方法，
其特征在于，使用分解酶组合物，所述分解酶组合物通过在一定量的中性蛋白酶和/或来自梭菌属(Clostridium.sp)的蛋白酶中，根据所述胰脏组织的胶原蛋白I和/或胶原蛋白III的组成，加入胶原蛋白I和/或胶原蛋白III分解量的梭菌属(Clostridium.sp)胶原酶G和/或胶原酶H而形成。
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