[发明专利]猪生殖与呼吸综合征病毒、组合物、疫苗及使用方法

说明书

序列表

本申请案包含序列表，其已根据37C.F.R.1.821-1.825以ASCII的格式以电子方式呈送。于2014年1月29日所产生的该ASCII复本名为10-0145-WO-1-SEQ.txt，其大小为124,804字节。伴随本申请案的序列表全部通过引用并入本文。

发明背景

A.技术领域

本发明系关于猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)组合物及相关方法。

B.相关技术描述

尽管大量努力针对病原体消除及控制策略，但养猪业仍因PRRSV而持续经历主要的经济损失。PRRSV系一种分类为套式病毒目(Nidovirales)、动脉炎病毒科(Arteriviridae)及动脉炎病毒属(Arterivirus)之包膜单链正义RNA病毒。该病毒导致猪生殖与呼吸综合征(PRRS)，且亦称为神秘猪病(MysterySwineDisease)及SIR。PRRS之症状包括育种雌性生殖失败及生长期猪之呼吸道疾病。生殖失败与中后期流产、木乃伊胎与弱出生仔猪数量增加及健康出生仔猪较少相关。PRRSV之特征亦在于通常由显微镜可见之如同间质性肺炎之厌食、发热及呼吸道疾病。因此，感染PRRSV对兽群之生产率可具有显著之负面效应。据估计，PRRSV每年使美国养猪业耗费约5亿6千万美元。复合情形系PRRSV在大多数猪生产国具地方性且在其它地方具有类似经济效应的事实。

目前用于预防病毒在兽群内及其之间传播的控制策略包括：适当管理育种动物、移除受感染个体、严格生物安全措施(包括空气过滤系统)、血清接种及使用疫苗。灭活与修饰(减毒)活疫苗两者均有市售。灭活疫苗产生高水平安全性，但一般认为无效或递送极有限程度之功效。减毒活疫苗已广泛用于减少由野生型PRRS病毒引起之传播及临床疾病。尽管修饰活疫苗之功效可针对异源分离株而变化，但其仍为可用于对抗疾病之最优选疫苗接种选择。

如同已报导疑似恢复毒性之若干种情形，减毒疫苗不带有任何风险。因此，新的疫苗需要能够提供充分免疫保护以减少传播及临床疾病，同时亦展现高度安全性及对遗传改变之抗性。

为增加遗传稳定性，已研发在nsp2(非结构蛋白质2)区具有源自细胞传代之缺失的病毒。nsp2蛋白质系最大之PRRSV蛋白质、具高度抗原性且具有最高遗传多样性之PRRSV基因体。缺失突变之值源自其所赋予之稳定性增加。较短之序列导致恢复毒性之可能性较小。缺失部分将需要插入以回复其初始状态，此比简单取代回到初始毒性形式更不可能发生。

发明概述

本发明提供克服本领域之缺陷之免疫原性组合物、疫苗及相关方法。该等组合物及方法尤其提供遗传稳定之PRRSV之免疫原性缺失突变体，由其可制得疫苗，包括减毒全病毒疫苗及多肽亚单位疫苗，其中该等疫苗赋予对由PRRSV感染引起之临床疾病之免疫性、对此疾病之保护抗性、减少此疾病之传播和/或减少此疾病。

本发明之例示性免疫原性组合物包含由SEQIDNO:1(PRRSV之预减毒Wetzel分离株)及SEQIDNO:2(Wetzel分离株之减毒形式)之核苷酸序列编码之多肽序列中之任一者或其片段，尤其为与其所源自之全长PRRSV蛋白质相比具有类似免疫原性特异性之在生物学或功能上(例如在免疫学上)具有活性之片段。所述多肽优选具有免疫原性且在投予多肽之动物体内诱发对PRRS病毒之免疫反应性反应，该反应对PRRSV具免疫保护性。