[发明专利]官能化表面的量化有效
申请号: | 201480010557.1 | 申请日: | 2014-04-25 |
公开(公告)号: | CN105122040B | 公开(公告)日: | 2018-02-16 |
发明(设计)人: | 时景诚 | 申请(专利权)人: | 迈卡尔迪斯公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/58 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司11127 | 代理人: | 庞东成,龚泽亮 |
地址: | 比利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 官能 表面 量化 | ||
1.一种量化至少一种官能团(1)的方法,所述至少一种官能团(1)使表面(2)官能化,所述方法包括如下连续的步骤:
a.提供具有微米尺寸并且被至少一种官能团(1)官能化的微粒的至少一个表面(2),
b.使所述表面(2)和溶液接触,
i.所述溶液至少包含第一浓度的第一试剂(4)和第二浓度的第二试剂(5),所述第一浓度与第二浓度之间的比例是预定的;
ii.所述第一试剂(4)和第二试剂(5)被设计用于以各自亲和力选择性地偶联到所述至少一种官能团(1)中的一种,所述亲和力的比例是预定的;
iii.所述第一试剂(4)被标记用于发射荧光,而所述第二试剂(5)未被标记;
c.测量偶联到所述表面(2)的所述第一试剂(4)的荧光并通过使用测量的所述第一试剂的荧光和所述预定的比例来量化所述官能团(1)。
2.如权利要求1所述的方法,其中,所述方法在步骤a)之前还包括活化步骤以便活化所述表面(2)的官能团(1)。
3.如权利要求2所述的方法,其中,所述活化通过至少一种化学反应进行。
4.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一浓度与第二浓度之间的比例为1:99~50:50。
5.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一试剂(4)和/或所述第二试剂(5)选自蛋白质、抗体、多肽、核酸或它们的混合物。
6.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述官能团(1)是选自羧酸或其衍生物、酮类、醛类的羰基。
7.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一试剂(4)和/或所述第二试剂(5)通过肽键偶联至所述表面(2)的官能团(1)。
8.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一试剂(4)和/或所述第二试剂(5)存在胺基,所述胺基参加与所述表面(2)的官能团(1)的偶联。
9.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述表面(2)由玻璃、硅或聚合物制得。
10.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一试剂(4)通过标记所述第二试剂(5)获得。
11.如权利要求10所述的方法,其中,所述第二试剂(5)是链霉亲和素。
12.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一试剂(4)被FITC、若丹明、青色素3、青色素5、488、Alexa532、Alexa647、ATTO 488、ATTO 532、ATTO 647N或它们的混合物标记。
13.如权利要求11所述的方法,其中,所述第一试剂(4)被FITC、若丹明、青色素3、青色素5、488、Alexa532、Alexa647、ATTO 488、ATTO 532、ATTO 647N或它们的混合物标记,并且其中所述链霉亲和素被ATTO 647N标记。
14.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一浓度与第二浓度之间的比例为2:98~25:75。
15.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一浓度与第二浓度之间的比例为3:97~10:90。
16.如权利要求1~3中任意一项所述的方法,其中,所述第一浓度与第二浓度之间的比例为4:96~7:93。
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