[发明专利]从凝结芽孢杆菌中产生部分纯化的细胞外代谢产物的方法及其生物应用

说明书

公开了从益生菌菌株凝结芽孢杆菌SBC‑37(以菌株号MTCC 5856保藏于微生物菌种保藏与基因库(Microbial Type Culture Collection and Gene Bank))中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的方法，所述菌株表现出与已知细菌菌株凝结芽孢杆菌ATCC 31284、凝结芽孢杆菌NBRC 3887和凝结芽孢杆菌ATCC 7050具有99％遗传同源性。还公开了所述细胞外代谢物制剂针对一组微生物病原的抗菌谱，包括当与协同防腐剂共混物组合时的制剂的协同抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61％w/w的百里酚，约38％的甘油一月桂酸酯和获自木兰的超临界流浸膏的约1％w/w的木兰醇。单独的细胞外代谢物制剂或所述细胞外代谢物制剂和防腐剂共混物的组合也以协同的方式抑制了微生物生物膜形成。

相关专利申请的交叉引用

本专利申请是于2013年12月24日提交的标题为“METHOD OF PRODUCINGPARTIALLY PURIFIED EXTRACELLULAR METABOLITE PRODUCTS FROM BACILLUS COAGULANSAND BIOLOGICAL APPLICATIONS THEREOF.”的临时专利申请US61920567的非临时申请。

发明背景

发明领域

本发明一般涉及益生菌制剂的抗菌效应。更具体地，本发明涉及(1)用于从益生菌菌株凝结芽孢杆菌SBC-37-01(保藏于微生物菌种保藏与基因库 (Microbial TypeCulture Collection and Gene Bank)，并分配菌株号MTCC 5856)中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的方法，所述菌株表现出与已知细菌菌株凝结芽孢杆菌ATCC 31284、凝结芽孢杆菌NBRC 3887和凝结芽孢杆菌 ATCC 7050具有99％遗传同源性，和(2)所述细胞外代谢物制剂针对一组微生物病原的抗菌谱，包括当与协同防腐剂共混物组合时的制剂的协同抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61％w/w的百里酚，约38％的甘油一月桂酸酯和获自木兰(Magnolia officinalis)的超临界流浸膏的约1％w/w的木兰醇。单独的细胞外代谢物制剂或所述细胞外代谢物制剂和防腐剂共混物的组合也显示以协同的方式抑制了微生物生物膜形成。

现有技术的描述

本领域已知，凝结芽孢杆菌的细胞外产物包括培养物凝结芽孢杆菌菌株的上清液或滤液，其适用于哺乳动物的皮肤或粘膜的局部应用，且从而能够用于抑制细菌、酵母、真菌、病毒及其组合的生长(US6905692，“Topical compositions containing probioticBacillus bacteria,spores,and extracellular products and uses thereof”)。本发明关于进一步纯化益生菌凝结芽孢杆菌 SBC37-01(保藏于微生物菌种保藏与基因库，并分配菌株号MTCC 5856) 的培养物的细胞外组分以获得浓缩的细胞外代谢物制剂，所述浓缩的细胞外代谢物制剂当与其自身单独的上清液相比较时、和当与协同的协同防腐剂共混物相组合时表现出增强的抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约61％ w/w的百里酚，约38％的甘油一月桂酸酯和获自木兰的超临界流浸膏的约 1％w/w的木兰醇。

本发明的主要目的是公开

1)从益生菌菌株凝结芽孢杆菌SBC37-01(保藏于微生物菌种保藏与基因库，菌株号MTCC 5856)中产生部分纯化的细胞外代谢物制剂的方法，所述菌株表现出与已知细菌菌株凝结芽孢杆菌ATCC 31284、凝结芽孢杆菌 NBRC 3887和凝结芽孢杆菌ATCC 7050具有99％遗传同源性。

2)所述细胞外代谢物制剂针对一组微生物病原的抗菌谱，包括当与协同防腐剂共混物组合时的制剂的协同抗菌作用，所述协同防腐剂共混物包括约 61％w/w的百里酚，约38％的甘油一月桂酸酯和获自木兰的超临界流浸膏的约1％w/w的木兰醇。