[发明专利]从缺乏染色质的细胞培养收获物中色谱纯化抗体

权利要求书

1.一种从蛋白制剂纯化所需抗体的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)使蛋白制剂与以下接触：以0.6-6％或6％-10％的范围内的量的尿囊素，和

(i)至少一种选自由下列各项组成的组的可溶性负电性添加剂：壬酸、壬烯酸、庚酸、庚烯酸、辛酸、辛烯酸和癸酸，或者

(ii)至少一种选自由下列各项组成的组的可溶性正电性多价离子：亚甲蓝、依沙吖啶、氯己定、苯扎氯铵和十六烷基三甲基溴化铵；

(b)随后去除固体，结果是去除了95％的染色质；并且然后

(c)将经调节的蛋白制剂施加到吸附色谱介质用于纯化所述所需抗体。

2.权利要求1所述的方法，其中步骤(c)在缓冲液平衡步骤后进行。

3.权利要求1所述的方法，其中所述可溶性正电性多价离子是依沙吖啶或十六烷基三甲基溴化铵。

4.权利要求1所述的方法，其中所述可溶性正电性多价离子以0.01％-0.05％的浓度范围存在。

5.权利要求1所述的方法，其中在步骤(c)之前，所述方法还包括使所述蛋白制剂与以固定到表面的正电性有机离子形式的不溶性正电性有机添加剂接触。

6.权利要求5所述的方法，其中所述不溶性正电性有机添加剂是选自由下列各项组成的组的一种或多种：伯氨基、仲氨基、叔氨基和季氨基。

7.权利要求6所述的方法，其中所述不溶性正电性有机添加剂包括三(2-氨基乙基)胺。

8.权利要求5-7中任一项所述的方法，其中所述不溶性正电性有机添加剂以2％、或1％、或3％、或4％、或5％的量存在。

9.权利要求1所述的方法，其中所述可溶性负电性有机添加剂是壬酸或辛酸。

10.权利要求1所述的方法，其中所述可溶性负电性有机添加剂以0.2％-0.5％的浓度范围存在。

11.权利要求1所述的方法，其中在步骤(c)之前，所述方法还包括使所述蛋白制剂与以固定到表面的负电性有机离子形式的不溶性负电性有机添加剂接触。

12.权利要求11所述的方法，其中所述不溶性负电性有机添加剂包括选自由下列各项组成的组的一种或多种：磷酸根、磺酸根、羧酸根、亚氨基二乙酸根、次氮基三乙酸根、天冬氨酸根和谷氨酸根。

13.权利要求1所述的方法，其中所述尿囊素以0.6-6％的范围存在。

14.权利要求1所述的方法，其中步骤(a)在防止所述所需抗体的沉淀的条件下实施所述方法。

15.权利要求1所述的方法，其中去除所述固体通过离心或过滤实现。

16.权利要求1所述的方法，其中向其施加所述经调节的制剂的吸附色谱介质是选自由下列各项组成的组的一种：生物亲和色谱介质、阳离子交换色谱介质、阴离子交换色谱介质和疏水相互作用色谱介质。

17.权利要求1所述的方法，其中向其施加所述经调节的制剂的吸附色谱介质是蛋白A亲和色谱介质。

18.权利要求1所述的方法，其中向其施加所述经调节的制剂的吸附色谱介质是选自由下列各项组成的组的一种：整体柱、膜和多个粒子。

19.权利要求1所述的方法，其中含有所述所需抗体的所述蛋白制剂是细胞培养收获物。

20.权利要求19所述的方法，其中所述细胞培养收获物是无细胞的细胞培养收获物或含有细胞的细胞培养收获物。