[发明专利]用于测量来自皮肤的抗微生物肽作为对微生物天然防护的客观量度的非侵入性方法

说明书

本发明公开了一种用于测量受试者皮肤健康的非侵入性方法，该非侵入性方法包括收集来自受试者的上皮细胞/皮肤细胞样品；检测在上皮细胞样品/皮肤细胞样品中的一种或多种抗微生物肽生物标记的含量；诊断受试者是否具有由于微生物侵袭皮肤而引发的防御机制或基于一种或多种抗微生物肽生物标记的含量测量系统是否与环境稳态平衡，所述一种或多种抗微生物肽生物标记选自组蛋白H2B型1‑M、组蛋白H2A、组蛋白H4、蛋白S100‑A7、蛋白S100‑A8、蛋白S100‑A9、组织蛋白酶G、中性粒细胞防御素3(防御素，α3)(HNP‑3)、皮离蛋白、核糖核酸酶7(RNA酶7)、人β防御素2(nBD‑2)和β防御素103(hBD‑3)以及在表1中列出的那些，其中AMP家族包括杀菌通透性增加蛋白(BPI)、防御素、组蛋白、成孔毒素、S100蛋白、细胞毒素、丝氨酸蛋白酶S1、双氧化酶、转录调节物、以及它们的混合物。本发明还公开了一种评估用于皮肤健康的产品功效的非侵入性方法。

技术领域

本发明涉及用于测量与由于微生物侵袭皮肤而引发的防御机制相关联的一种或多种生物标记的量的方法、或基于一种或多种抗微生物肽生物标记的含量测量系统是否与环境稳态平衡、以及这些生物标记的量的关联与相关性，因为它直接关联哺乳动物皮肤健康的改善。

背景技术

头皮/皮肤是显著的器官系统，由起到对环境侵袭的第一道防线功能的多个特化组织构成。虽然早期的研究主要集中于皮肤的阻隔功能，已经变得清楚的一点是这个器官是动态的：对甚至是环境中微小的变化感测并响应，从而帮助保持内稳态。环境影响诸如太阳辐射、污染、或者甚至皮肤护理产品的施用导致复杂的级联事件，它们最终导致数百或者数千个基因表达的改变。基因表达的这些改变一般被翻译成催化化学反应的蛋白生成的改变(或积聚、释放、改性等等)，最终导致细胞响应。随着这些化学反应的进行，常常留下代谢副产物作为已经发生了何种化学过程的指示。分析与给定皮肤病症例如头皮屑相关联的这些所得蛋白和小分子生物标记可提供有价值的信息，用于了解病症以及开发用于诊断和/或改善皮肤病症目的的产品。头皮屑是一种常见的慢性复发性头皮病症，具有片状剥落和瘙痒感。头皮屑的发病机理是复杂的，并且好像是头皮、微生物区系和宿主免疫系统之间相互作用的结果。对这种病症的许多之前的工作已经集中于检查一些表面水平的现象。传统的基于专家观察的评估及基于自我观察的评估与基于大型仪器的在生理水平上的表皮结构和功能评估相结合。新的生物分子学能力达到了病理生理的理解深度，而非之前用传统研究方法达到的理解深度；然而，对导致这种病症的关键症状的分子事件的清晰了解仍未出现。为了解释这些关键分子事件，可通过皮肤表面的胶带剥除、随后通过化学或生物分析方法，来非侵入性地获得生物分子取样。组胺最近被鉴定为头皮瘙痒的敏感生物标记。需要另外的生物标记以允许更详细的头皮屑病症的病理生理描述，以及用作指示头皮屑治疗方案程度和完成度的相关量度。受关注的一个此类区域是抗微生物肽(AMP)。

抗微生物肽(AMP)是进化上保守的分子，涉及广泛多种生物体的防御机制。在细菌、昆虫、植物和脊椎动物中产生的AMP保护生物体不受广泛多种传染性病原体的侵袭。在哺乳动物中，这些肽防御细菌、病毒、真菌、和某些寄生虫。最近，已经证明了AMP的新生物学效应，诸如内毒素中和作用、趋化及免疫调节活性、诱导血管新生和创伤修复。因此，这些分子是先天免疫系统的关键组分和生物标记的引人注目的候选者。具体地，针对皮肤和头皮，AMP对于皮肤和头皮健康是重要的，这是由于一旦表皮的物理结构已经受到损伤，它们能够进行化学防御或形成屏障。AMP在生物体的主要屏障诸如皮肤和粘膜上皮以及皮肤中潜在的微生物侵入部位诸如毛囊结构和汗腺上表达，从而阻止病原体定植宿主组织。此外，这些肽以颗粒形式存储在吞噬细胞内，在那里它们帮助杀灭被吞噬的微生物。抗微生物肽的作用模式存在差异，并且包括破坏细胞膜、干扰代谢、以及靶向细胞质组分。AMP难以分类，这归因于它们显著的多样性。基于它们的氨基酸组成、大小和构象结构，可将AMP分成若干类型，诸如具有α螺旋结构的肽、具有由二硫键稳定的β片层结构的肽、具有延伸结构的肽、以及具有环状结构的肽。所有这些AMP的特性共同使得这些肽成为新型生物标记的引人注目的候选者。

发明内容