[发明专利]用于结核病的预防或治疗的合成免疫原

说明书

公开了包含编码TB esat‑6蛋白的核酸分子的组合物。公开了诱导个体的针对TB的免疫应答的方法。公开了治疗已被诊断患有TB的个体的方法。公开了预防个体的TB感染的方法。

技术领域

本发明涉及编码结核病(TB)免疫原(编码免疫原性TB抗原)的多价构建体。每一种构建体编码多个免疫原性TB抗原并且具有被设计用于高水平表达的的编码序列。提供了预防性和治疗性疫苗，以及制造和使用所述疫苗来诱导免疫应答、从而预防TB感染和治疗感染TB病毒的个体的方法。

背景技术

结核病(TB)是在全球具有显著发病率和死亡率的重大传染病。目前唯一得到许可的针对TB的疫苗是卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin)(BCG)疫苗。不幸的是，该疫苗赋予弱的抗成人肺TB的保护作用，并且已与不利事件相关联。因此，迫切需要开始诱导抗TB的长效保护作用的新型有效的疫苗。然而，由于多种因素，迄今只研究了少数已被确定为诱导针对TB的T细胞免疫的只有几个抗原。这些抗原包括Ag85A、Ag85B、ESAT6、TB10.4和Mtb39a。一个问题是，存在许多从其选择的TB抗原并且目前用于递送TB抗原的技术是有限的和昂贵的。

仍然存在对可诱导针对免疫原性TB抗原的免疫应答的、保护以免受TB感染和为被TB感染的个体提供有效治疗的经济有效的TB疫苗和方法的需要。还存在对使得能够进行大规模抗TB疫苗接种的具有成本效益的递送系统的需要。

附图说明

图1A描绘多价esx疫苗质粒的构建和三价表达载体的体外表达。

图1B提供显示5个esx构建体的抗原表达的数据。

图2A和图2B显示多价TB疫苗构建体的经修饰的氨基酸插入序列。

图3显示响应多价疫苗施用的体液免疫应答。

图4A-图4C提供显示对多价疫苗的细胞免疫应答的柱形图。

图5A和5B描绘pVSW、pBCU、pDQE、pHAT和pORF(pVSW.2、pBCU.2、pDQE.2、pHAT.2和pORF.2)插入物和质粒的新形式的构建并且包括显示所述插入物在用所述质粒转染的哺乳动物细胞中表达的实验结果。

图6A-图6F显示实验设计和来自比较针对质粒的5种新形式(pVSW、pBCU、pDQE、pHAT和pORF的新形式(pVSW.2、pBCU.2、pDQE.2、pHAT.2和pORF.2))的每一种中包含的3种特定esx抗原的每一种诱导的免疫应答的实验的结果。图6A描述实验设计。图6B显示利用质粒pDQE的新形式接种的小鼠中的针对esxD、esxQ和esxE的免疫应答的实验结果。图6C显示利用质粒pVSW的新形式接种的小鼠中的针对esxV、esxS和esxW的免疫应答的实验结果。图6D显示利用质粒pBCU的新形式接种的小鼠中的针对esxB、esxC和esxU的免疫应答的实验结果。图6E显示利用质粒pORF的新形式接种的小鼠中的针对esxO、esxR和esxF的免疫应答的实验结果。

图7A-图7C显示评价利用pVSW、pBCU、pDQE、pHAT和pORF的新形式(pVSW.2、pBCU.2、pDQE.2、pHAT.2和pORF.2)的组合接种后的esx-特异性CD4和CD8 T细胞应答的实验的实验结果。图7A显示用于分析对于IFN-和TNF-细胞因子都是阳性的CD4和CD8 T细胞的频率的门控策略。图7B显示esx-特异性CD4 T细胞免疫应答。图7C显示esx-特异性CD4 T细胞免疫应答。

图8A-图8C显示实验设计和来自将利用RSQ-15(每一种pVSW、pBCU、pDQE、pHAT和pORF的新形式(pVSW.2、pBCU.2、pDQE.2、pHAT.2和pORF.2)的混合物)免疫的动物的免疫应答与由TB疫苗BCG诱导的免疫应答相比较的实验的结果。