[发明专利]禽类胚胎细胞的制备

权利要求书

1.一种制备禽类胚胎细胞的方法，其包含：

a)由禽蛋获得禽胚，

b)由完整胚胎制备细胞，以及

c)任选地，以20微米以上过滤细胞制备物。

2.一种由胚胎制备禽类胚胎细胞的改进的方法，改进在于由完整胚胎制备细胞以及随后以20微米以上过滤细胞制备物。

3.权利要求1的方法，其中在过滤步骤c)之前或之后培养或扩增所述禽类胚胎细胞。

4.权利要求1的方法，其中所述禽类胚胎细胞在过滤步骤c)之前或之后被病毒感染。

5.权利要求1的方法，其中所述禽蛋为无特定病原体的禽蛋。

6.权利要求1的方法，其中将几个完整禽胚置于一个或几个合适容器中，所述一个或几个容器中的每个容纳大约50到150个胚胎。

7.权利要求1的方法，其中通过在20℃到40℃之间的温度下对所述完整胚胎进行酶处理来制备所述胚胎细胞。

8.权利要求1的方法，其中所述禽类胚胎细胞为成纤维细胞。

9.权利要求1的方法，其中所述禽类为鸡。

10.权利要求1的方法，其中将所述细胞维持在无血清培养基中。

11.能够通过权利要求1的方法获得的禽类胚胎细胞、或所述细胞的祖细胞的培养物或组合物。

12.一种禽类胚胎细胞的培养物或组合物，其中所述细胞或其祖先由完整胚胎制备得到并已经以20微米以上进行过过滤。

13.权利要求11的培养物或组合物，其中所述禽类胚胎细胞为鸡胚成纤维细胞。

14.权利要求12的培养物或组合物，其中所述禽类胚胎细胞为鸡胚成纤维细胞。

15.权利要求12的培养物或组合物，其中所述细胞被病毒感染。

16.生产或扩增病毒的方法，其包含用病毒感染权利要求12的细胞，以及任选地收集所生产的病毒。

17.权利要求16的方法，其中随后将生产或扩增的病毒灭活。

18.权利要求16的方法，其中所述病毒为MDV。

19.一种生产病毒疫苗的方法，其包含(i)在允许病毒生产或扩增的条件下用病毒感染权利要求12的细胞，(ii)任选地，收集生产或扩增的病毒，(iii)任选地，将在(i)或(ii)中生产或扩增的病毒灭活，以及(iv)将生产或扩增的病毒配制为疫苗组合物。

20.权利要求19的方法，其中将所述生产或扩增的病毒收集、分离、以20微米以上过滤、任选地灭活、以及配制为疫苗组合物。

21.权利要求19的方法，其中在步骤(i)之前以20微米过滤所述细胞，且将细胞上清液或细胞碎片用于生产所述疫苗。

22.权利要求19的方法，其中所述病毒为MDV。

23.一种疫苗组合物，其包含通过权利要求16的方法获得的病毒以及合适的赋形剂或载体。