[发明专利]显性雄性不育的操纵

权利要求书

1.一种靶向小麦MS45基因启动子的表达盒，其中所述表达盒包含核酸分子，所述核酸分子包含启动子反向重复序列，所述启动子反向重复序列靶向(a)由SEQ ID NO: 1、2或3的核苷酸序列组成的多核苷酸。

2.一种在小麦植物或小麦植物细胞中表达多核苷酸的方法，所述方法包括将包含有效连接到目的异源多核苷酸的启动子的表达盒引入到所述植物或所述植物细胞中，其中所述启动子由选自以下的核苷酸序列组成：

(a) 由SEQ ID NO: 1、2或3的核苷酸序列组成的核苷酸序列；以及

(b) 由SEQ ID NO: 1、2或3的核苷酸序列组成的核苷酸序列，其中所述序列在植物细胞中引发转录。

3.一种在表现出雄性不育的小麦植物的后代中恢复雄性育性的方法，所述方法包括将小麦植物的育种对杂交，所述小麦植物的育种对包括：(a)第一植物和第二植物，其中所述第一植物包含外源核酸分子，所述外源核酸分子当被表达时抑制所述第一植物的功能获得性雄性育性基因或所述第一植物的使用启动子反向重复序列驱动所述功能获得性雄性育性基因的启动子，其中所述启动子反向重复序列靶向SEQ ID NO: 1、2和/或3的多核苷酸且抑制内源Ms45基因的表达，使得所述第一植物为雄性不育，和(b)第二植物，其中所述第二植物表达功能获得性雄性育性基因，使得所述第二植物为雄性可育，并且其中所述第二植物中的所述功能获得性雄性育性基因在所述第二植物与所述第一植物杂交时能够恢复雄性育性；和

获得雄性可育的后代。

4.一种增加雄性不育小麦种子的方法，所述方法包括：

(a) 将第一小麦植物去雄，所述第一小麦植物对于功能获得性雄性育性基因半合并且其中所述功能获得性雄性育性基因与(1)破坏雄性繁殖组织的功能和/或发育的基因和(2)标记基因有效连接；

(b) 用来自第二小麦植物的花粉为所述第一小麦植物进行传粉，其中所述植物为雄性可育并且包含靶向所述第二小麦植物的功能获得性雄性育性基因的外源核酸构建体，其中所述外源核酸构建体包含启动子反向重复序列，所述启动子反向重复序列靶向选自SEQ IDNO: 1、2或3的多核苷酸且抑制内源Ms45基因的表达，并且其中所述第二小麦植物包含保持所述第二小麦植物中的育性的功能获得性雄性育性基因；

(c) 收获种子；

(d) 选择包含以下的种子：(1)与所述破坏雄性繁殖组织的功能和/或发育的基因和所述标记基因有效连接的所述功能获得性雄性育性基因及(2)所述靶向所述第二小麦植物的功能获得性雄性育性基因或启动子的外源核酸构建体；

(e) 种植来自步骤(d)的种子；

(f) 使从步骤(d)的种子生长的植物自花传粉；

(g) 收获来自步骤(f)的所得后代的种子；

(h) 对步骤(g)中收获的种子选择表达所述标记的种子，其中所述表达所述标记的种子(1)对于与所述破坏雄性繁殖组织的功能和/或发育的基因和所述标记基因连接的功能获得性雄性育性基因半合及(2)对于所述外源核酸纯合；

(i) 种植来自步骤(h)的种子；

(j) 使从步骤(i)的种子生长的植物自花传粉；

(k) 收获来自步骤(j)的所得后代的种子；

(l) 对步骤(k)中收获的种子选择对于所述靶向所述植物的功能获得性雄性育性基因的外源核酸构建体纯合并且不含有所述标记基因的种子。

5.一种增加雄性不育小麦植物的方法，所述方法包括：

a. 用来自包含与破坏雄性繁殖组织的功能和/或发育的基因和标记基因有效连接的功能获得性雄性育性基因及靶向第二植物的功能获得性雄性育性基因的外源核酸构建体的植物的花粉为从权利要求4的步骤(l)的种子生长的植物进行传粉；并且

b. 收获来自步骤(a)的所得后代的种子，其中对于靶向所述植物的功能获得性雄性育性基因的外源核酸抑制分子纯合的种子为雄性不育并且不含有所述标记基因。

6.一种产生雄性不育雌性小麦植物的方法，所述方法包括：

c. 种植来自权利要求4的步骤(l)的种子，并且

d. 使所述种子生长成植物，其中所得的植物对于所述外源核酸构建体纯合并且为雄性不育。