[发明专利]筛选具有美白功效的物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种筛选具有美白功效的物质的方法，更具体地，涉及一种通过利用叉头框蛋白O3a(Forkhead box O3A)来确认试验物质是否激活叉头框蛋白O3a或促进叉头框蛋白O3a的表达，从而判定试验物质是否具有美白功效的方法，所述叉头框蛋白O3a为长寿基因叉头框O3(Forkhead box O3)基因所编码的蛋白质。

背景技术

黑色素是决定人皮肤颜色的色素，皮肤的颜色由该黑色素的量和分布而决定。形成黑色素的细胞是在皮肤表皮下的称为黑色素形成细胞(Melanocyte)的细胞中形成，并通过皮肤的新陈代谢移动到角质表面，并脱落。不管皮肤颜色如何，黑色素形成细胞的数量几乎相同。只是由于产生黑色素的量和种类及分布不同，因此皮肤颜色方面有差异。皮肤中的酪氨酸(Tyrosine)通过称为酪氨酸酶(Tyrosinase)的人体酶转化成多巴(DOPA)，并通过一系列的氧化过程，最终形成作为黑褐色聚合物的黑色素。

黑色素不能在活体内分解，而是通过角质形成细胞在从表皮脱落时与黑色素一起从皮肤上脱落而被去除。当这种黑色素过度产生时，将诱发诸如黄褐斑、雀斑或痣等的色素过度沉着症，从而对美容方面带来不好的结果，因此，目前对预防因运动等户外活动中的紫外线所引起的黑色素沉着的要求呈增加的趋势。因此,目前的情况为,对于开发一种阻碍黑色素过度形成的美白剂方面的需求正在增大。

因此，寻找这种阻碍黑色素生成而具有美白功效的物质成为重要的问题。需要开发出一种并非通过感官评价或视觉性评价，而是通过客观的基准来确认及判断试验物质的美白功效的方法。

发明内容

要解决的技术问题

对此，本发明人着眼于利用叉头框蛋白O3a能够确认是否具有美白效果这一点，从而完成了本发明，所述叉头框蛋白O3a为长寿基因叉头框O3基因所编码的蛋白质。

因此，本发明的目的在于，提供一种利用叉头框蛋白O3a来筛选具有美白功效的物质的方法。

技术方案

为了实现上述目的，本发明提供一种筛选具有美白功效的试验物质的方法，所述筛选方法包含确认是否激活叉头框蛋白O3a或促进叉头框蛋白O3a的表达。

根据本发明的叉头框蛋白O3a是由已知的长寿基因叉头框O3所编码的蛋白质，并且作为位于胰岛素信号传导通道(IIS，Insulin/IGF-like signaling)的转录因子，是一种对诸如锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(Catalase)等的酶的表达起作用的蛋白质。如果叉头框蛋白O3a得到激活，则通过体内防御机制的激活来实现抗老化功效。可以通过叉头框蛋白O3a向核的移动来判断所述叉头框蛋白O3a的激活。即，存在于细胞质内的叉头框O3向核移动，从而开始酶的表达。

本发明人确认了根据叉头框蛋白O3a激活的核移动程度和黑色素生成减少程度成比例。因此，通过对皮肤细胞处理测定为具有美白功效的候选物质来确认是否激活叉头框蛋白O3a或促进叉头框蛋白O3a表达，从而能够简单客观地确认所述物质是否为减少黑色素生成而显示出美白功效的物质。

因此，本发明提供一种筛选具有美白功效的物质的方法，其特征为，作为筛选具有美白功效的物质的方法，通过确认试验物质是否激活编码叉头框蛋白O3a(Forkhead box O3A)蛋白质的基因或促进所述基因的表达来实现。

在本发明的一实施例中，确认所述试验物质是否激活叉头框蛋白O3a的方法可以包含以下步骤：a)使用欲试验的物质对皮肤细胞进行处理；以及观察在所述a)步骤中，经过试验物质处理后的皮肤细胞中的叉头框蛋白O3a的移动。

所述筛选方法可以进一步包含以下步骤：c)如果叉头框蛋白O3a在所述皮肤细胞中向核移动，则判定该物质为具有美白功效的物质。这是因为可以将叉头框蛋白O3a向核的移动视为叉头框蛋白O3a的编码基因得到激活。而且，通过所述筛选方法判定为具有美白功效的物质能够通过叉头框蛋白O3a来开始抗氧化酶的表达，因此，可以判定为显示出抗老化及抗氧化的同时显示出美白功效的物质。

所述步骤a)中的试验物质可以根据试验物质的种类的不同而不同，但是优选以1nM至100nM的浓度进行处理。如果以小于1nM的浓度进行处理，则不能达到试验物质的功效浓度；如果以大于100nM的浓度进行处理，则因过度的功效而细胞稳态会发生异常，反而减少核移动及美白功效。

所述皮肤细胞可以为角质形成细胞、成纤维细胞或黑色素形成细胞。