[发明专利]提高L-半胱氨酸生产能力的属于肠杆菌科的细菌

说明书

本发明提供一种被改造以降低O‑乙酰丝氨酸硫化氢解酶B活性的属于肠杆菌科的细菌，其特征在于，所述属于肠杆菌科的细菌被改造以使硫代硫酸结合蛋白质的C末端区域缺失，且在硫酸盐存在下提高L‑半胱氨酸生产能力，通过使用该属于肠杆菌科的细菌，能够廉价高效地制造L‑半胱氨酸。

技术领域

本发明涉及一种在硫酸盐存在下提高L-半胱氨酸生产能力的属于肠杆菌科的细菌、以及使用该细菌制造L-半胱氨酸的方法。

背景技术

半胱氨酸、胱氨酸类被广泛应用于医药品、化妆品、食品等多个领域。由于半胱氨酸是主要由人类和动物的毛发较多含有的氨基酸，因此过去是通过水解这些毛发来制造半胱氨酸。然而从进一步提高产品的安全性以及减少对环境影响的观点出发，人们期待与其他很多氨基酸相同的发酵法进行制造。

目前已报告了多种通过使用属于肠杆菌科的细菌的发酵法制造半胱氨酸的方法(专利文献1和2)。对于属于肠杆菌科的细菌，如大肠杆菌，作为生物合成半胱氨酸的途径存在两种途径，即硫酸盐作为硫源使用的途径(硫酸途径)和硫代硫酸盐作为硫源使用的途径(硫代硫酸途径)(非专利文献1)。

已知使用属于肠杆菌科的细菌制造半胱氨酸时，一般作为硫源使用仅包含硫酸盐的培养基也不能有效制造半胱氨酸，但是作为硫源使用硫酸盐的基础上还包含硫代硫酸盐的培养基，则更有效制造半胱氨酸。

然而作为硫源使用的硫代硫酸盐，相比于硫酸盐非常昂贵。因此人们寻求研发出作为硫源使用廉价的硫酸盐且有效制造半胱氨酸的方法。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：WO2009/104731

专利文献2：特开2010-193788号公报

非专利文献

非专利文献1：Nakatani et al.,‘Enhancement of thioredoxin/glutaredoxin-mediated L-cysteine synthesis from S-sulfocysteine increases L-cysteineproduction in Escherichia colo’,Microbial Cell Factories,2012,11:62

发明内容

本发明的目的在于提供一种在硫酸盐存在下提高L-半胱氨酸生产能力的属于肠杆菌科的细菌、以及使用该细菌廉价且有效地制造L-半胱氨酸的方法。

本发明人经过深入研究发现，O-乙酰丝氨酸硫化氢解酶B缺乏且硫代硫酸结合蛋白质的C末端区域缺失的大肠杆菌突变株在仅含硫酸盐作为硫源的培养基中也发挥很高的L-半胱氨酸生产能力。基于这些认识进一步研究后完成了本发明。

即，本发明包含以下方面。

项1、一种属于肠杆菌科的细菌，所述属于肠杆菌科的细菌被改造以降低O-乙酰丝氨酸硫化氢解酶B的活性，其特征在于，

所述属于肠杆菌科的细菌被改造，以使硫代硫酸结合蛋白质的C末端区域缺失，且在硫酸盐存在下提高L-半胱氨酸生产能力。

项2、根据项1所述的细菌，其特征在于，所述硫代硫酸结合蛋白质是下述(a)或(b)中记载的蛋白质：

(a)由序列号1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；或者

(b)由与序列号1所示的氨基酸序列具有85％以上同一性的氨基酸序列组成，且具有硫代硫酸结合活性的蛋白质。

项3、根据项2所述的细菌，其特征在于，所述C末端区域是下述(c)或(d)中记载的区域：

(c)包含由序列号1所示的氨基酸序列中第274～300位的氨基酸组成的区域的区域；或者