[发明专利]自干生物质制备啶南平

说明书

本申请主张2013年3月28日申请的EP13161548.6的优先权，该案以其全文引用方式并入本文中。

发明领域

本发明涉及制备啶南平(pyripyropene)生产者生物体的干生物质的方法、自该干生物质获得啶南平的方法，及关于自干生物质所得的啶南平制备式III和/或式IV和/或式V化合物的方法。本发明实际上进一步关于干生物质本身、及使用该干生物质以获得用于制备式III和/或式IV和/或式V化合物的啶南平的方法，包括使用该干生物质以获得啶南平或式III和/或式IV和/或式V化合物来制备包含该化合物的害虫控制组合物，特别是杀昆虫剂的方法。

发明背景

啶南平是一组自然生成的化合物，该化合物由微生物及尤其由若干种丝状真菌以二次代谢产物形式所产生。该化合物群组已受到注意，此乃因为其显示针对大鼠肝脏微粒体中Acyl-CoA胆固醇酰基转移酶(ACAT)具有极强效的抑制作用(JournalofAntibiotics(1996)，49(3)，292-298)并针对于若干种昆虫(例如，针对于棉铃虫(Helicoverpaarmigera)幼虫(AppliedandEnvironmentalMicrobiology(1995)，61(12)，4429-4435)、小菜蛾(Diamondbackmoth)幼虫(W02004/060065)、黄粉虫(Tenebriomolitor)(W02004/060065)及蚜虫(aphids)(W02006/129714))具有杀昆虫活性。

迄今为止，啶南平的化学合成仍非常困难，因此大比例的啶南平仍旧通过微生物发酵作用加以制备。具有可制备啶南平的能力的微生物为(例如)粪生青霉(Penicilliumcoprobium)PF-1169菌株(JournalofTechnicalDisclosure第500997/2008号)、熏烟曲霉(Aspergillusfumigatus)IF0-1289菌株(日本专利公开公开案第360895/1992号)、网状孢正青霉(Eupenicilliumreticulosporum)NRRL-3446菌株(AppliedandEnvironmentalMicrobiology(1995)，61(12)，4429-4435)、灰黄青霉(Penicilliumgriseofulvum)F1959菌株(W02004/060065)、以及熏烟曲霉(Aspergillusfumigatus)FO1289及其突变体熏烟曲霉FO1289-2501。极普遍地，在该微生物中(例如熏烟曲霉FO1289及其突变体熏烟曲霉FO1289-2501)不仅会产生一种而是会产生在其侧链结构具有差异性的若干种不同的啶南平(JournalofAntibiotics(1996)，49(3)，292-298)。

在啶南平领域的研究不仅可识别出产生啶南平的微生物及不同种类的自然生成的啶南平，而且可提供数目庞大的通过化学修饰自然生成的啶南平制得的啶南平衍生物。该衍生物及其制备方法的实例公开于EP1889540、EP2119361、EP2186815及EP2426124中。

获得全部可能的该受关注天然化合物群组及其衍生物需要利用有效大规模的制备啶南平的方法。然而，经由微生物的发酵作用产生啶南平及其经由从所制得的生物质萃取的收集物仍旧存在技术性问题，且在处理及所制得生物质的储藏会引起和/或与在从生物质萃取啶南平期间及之后的大体积的处理相关的高成本问题。尤为重要的技术性问题为(例如)欠缺长期储藏所制得生物质的方法及从大体积生物质中萃取出啶南平期间所出现的高过滤阻力。

本发明部分上基于与自未经干燥的物质的萃取相比，可自干生物质分离啶南平而不会对萃取的啶南平的产率造成负面影响的发现。同时地，干生物质的产生及其于萃取啶南平的使用在储藏生物质期间显著地增强稳定性，减小经处理的体积，在萃取啶南平中获致低过滤阻力及在萃取之后获得较高浓度的啶南平。

发明内容

本发明包括一种获得至少一种啶南平的方法，该方法包括以下步骤：

a)将啶南平生产者生物体于培养条件下培养在培养液中，其中可制得至少一种啶南平，

b)自步骤a)中所获得生物质的至少一部分制备干生物质，

c)自步骤b)中所制得的该干生物质获得至少一种啶南平。

该方法包括其中步骤b)中所制得的该干生物质直接通过喷雾干燥包含生物质的培养液制得，或通过干燥自培养液获得的湿生物质制得的步骤。

该湿生物质可自培养液通过以下获得：

a)过滤和/或离心，或