[发明专利]具有一个氨基的聚乙二醇的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有一个氨基的聚乙二醇化合物的纯化方法，该化合物用于药物用途。更具体地，本发明是用于获得高纯的具有一个氨基的聚乙二醇化合物的纯化方法，该聚乙二醇化合物是用于在药物递释系统中的化学改性用途的高分子量的活化的聚乙二醇并且用作其原材料。

本发明特别适合于包括多肽、酶、抗体和其他低分子药物、包括基因、寡核苷酸等的核酸化合物、核酸药物、以及其他生理活性物质的改性或诸如脂质体、聚合物胶束和纳米粒子的药物递释系统载体的应用的药物用途。

背景技术

最近，活化的聚乙二醇已经被广泛用作药物递释系统的重要载体。作为用于药物用途目的的此类活化聚乙二醇，从通过对其改性而制造的药物的性质和安全的角度，已经要求那些活化聚乙二醇仅含极少杂质。具有氨基的聚乙二醇自身就是药物的改性剂，并且也是用于合成其他活化聚乙二醇的原材料。当具有一个氨基的聚乙二醇中含有不具有氨基的聚乙二醇作为杂质时，在使用其作为原材料合成活化聚乙二醇的情况下，不能合成高纯的具有一个氨基的活化聚乙二醇。因此，当产物键合至药物时改性率降低，并且存在不能获得期望的效果的可能性。由于作为杂质的不具有氨基的聚乙二醇化合物和具有一个氨基的聚乙二醇是高分子量化合物，所以物理化学性质是相似的，使得难以通过普通技术相互分离。

另一方面，键合至聚乙二醇后的药物纯化也存在其分离困难的技术问题。在进行纯化的情况下，药物收率显著降低，并因此制作成本上升。因此，希望尽可能地在键合至药物之前除去作为杂质的聚乙二醇化合物。

通常，在从大分子化合物除去诸如低分子化合物和盐的杂质的情况下，经常执行结晶操作和萃取操作。在要除去的杂质是低分子的情况下，取决于分子量的巨大差异，物理化学性质显著不同，并且特别是，由于产生溶解性方面的巨大差异，所以使分离和纯化成为可能。另一方面，在杂质的分子量大的情况下，在诸如溶解性的物理化学性质方面不会出现巨大差异。因此，难以通过用于除去低分子杂质的普通操作从具有一个氨基的聚乙二醇化合物中分离并除去不具有氨基的聚乙二醇化合物。

另一方面，关于具有氨基的低分子量化合物，当其在低pH下质子化时，由于离子相互作用而使亲水性增强。因此，在杂质的亲水性低的情况下，使用适合的有机溶剂通过萃取操作能够将杂质萃取至有机层以将其除去。然而，由于聚乙二醇化合物自身具有强亲水性，所以难以利用水性层和单一疏水有机层通过萃取将具有一个氨基的聚乙二醇化合物作为杂质的不具有氨基的聚乙二醇化合物分离。另一方面，当使用诸如作为聚乙二醇化合物的良好溶剂的卤代烃的有机溶剂时，聚乙二醇化合物无视氨基的存在而被萃取至有机层，使得也不可能分离和纯化。

此处，描述了传统技术的性能特征并描述了通过传统技术纯化具有一个氨基的聚乙二醇化合物是否可能和传统技术是否能够在工业规模中进行。

作为一种方法，如专利文献1(JP-A-8-165343)中所示，在具有氨基的聚乙二醇的情况下，能够使用离子交换树脂通过层析来分离。然而，由于这样的使用离子交换树脂的纯化方法是主要利用固体表面的相互作用及吸附现象的方法，所以必须在稀释溶液条件下使用大量树脂来执行纯化处理。由于必须在步骤中的聚乙二醇化合物的浓度为约1～2％的这样的稀释下进行该步骤，以抑制分离能力的降低，使得该方法从工业生产率的角度来讲不是充分令人满意的。而且，最后，排放大量的离子交换树脂的废料，因此该方法也是在工业应用中存在问题的纯化方法。

另一方面，如专利文献2(JP-A-2010-254978)中所示，存在使作为杂质的聚乙二醇化合物物理吸附在吸附剂上并除去的方法。当使用适合的吸附剂时，优先吸附作为杂质的具有两个羟基的聚乙二醇杂质，但是并未描述能够根据氨基的存在与否选择性地除去杂质。此外，在于工业规模中执行该方法的情况下，存在吸附处理之后大量的过滤掉的吸附剂成为废料的问题。

另一方面，如专利文献3(JP-A-2010-254981)中所示，存在将高分子量聚乙二醇与有机溶剂在水中混合，以分馏并除去具有不同分子量的杂质的方法。通过控制水溶性的盐浓度和萃取温度使除去具有不同分子量的杂质变为可能。由于该方法是简单方法，所以该方法能够在工业规模中进行，并且存在不排放诸如吸附剂的废料的巨大优势。然而，通过该方法，不能根据氨基的存在与否来将具有相同分子量的聚乙二醇化合物彼此分离。