[发明专利]细胞外核酸的稳定化和分离在审
申请号: | 201480021291.0 | 申请日: | 2014-03-18 |
公开(公告)号: | CN105121643A | 公开(公告)日: | 2015-12-02 |
发明(设计)人: | 拉尔夫·怀里希;托斯滕·沃斯;丹尼尔·格勒尔兹 | 申请(专利权)人: | 凯杰有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 杨青;缑正煜 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 核酸 稳定 分离 | ||
1.用于收集含有细胞的生物样品的容器,其中所述容器包含丁酰胺和选自下列的至少一种其他添加剂:
-凋亡抑制剂,
-抗凝剂,和
-式1的化合物
其中R1是氢或烷基,优选为C1-C5烷基、C1-C4烷基或C1-C3烷基,优选为C1-C2烷基,R2和R3相同或不同,并选自氢和以直链或支链方式排列的碳链长度为1-20个原子的烃基,并且R4是氧、硫或硒,优选地R4是氧。
2.权利要求1的容器,其中所述容器包含适用于使含有细胞的生物样品稳定的组合物,其中所述组合物包含丁酰胺和选自下列的至少一种其他添加剂:
-凋亡抑制剂,
-抗凝剂,和
-式1的化合物
其中R1是氢或烷基,优选为C1-C5烷基、C1-C4烷基或C1-C3烷基,优选为C1-C2烷基,R2和R3相同或不同,并选自氢和以直链或支链方式排列的碳链长度为1-20个原子的烃基,并且R4是氧、硫或硒,优选地R4是氧。
3.权利要求2的收集容器,其中该稳定化组合物包含的凋亡抑制剂是半胱天冬酶抑制剂。
4.权利要求1至3的一项或多项的收集容器,其中所述容器包含:
a)丁酰胺,其浓度使得当所述含有细胞的生物样品被收集至所述容器中时,丁酰胺在得到的混合物中的浓度为至少0.25%(w/v)、至少0.3%(w/v)、至少0.4%(w/v)、至少0.5%(w/v)、至少0.75%(w/v)或至少1%(w/v)、至少1.5%(w/v)、至少1.75%(w/v)、至少2%(w/v)或至少2.5%(w/v),以及其中优选地,得到的混合物包含的丁酰胺浓度在以下范围内:0.25%(w/v)至15%(w/v)、0.5%(w/v)至12.5%(w/v)、0.75%(w/v)至10%(w/v)、0.8%(w/v)至9%(w/v)、0.9%(w/v)至8%(w/v)、1%(w/v)至7%(w/v)、1.1%(w/v)至6%(w/v)、1.2%(w/v)至6%(w/v)、1.3%(w/v)至5.5%(w/v)、1.4%(w/v)至5.25%(w/v)、1.5%(w/v)至5%(w/v)、1.75%(w/v)至4.75%(w/v)、2.0%(w/v)至4.5%(w/v)、2.2%(w/v)至4.25%(w/v)、2.3%(w/v)至4%(w/v)、2.4%(w/v)至3.75%(w/v)或2.5%(w/v)至3.5%(w/v);以及
b)至少一种半胱天冬酶抑制剂,其浓度使得当所述含有细胞的生物样品被收集至所述容器中时,所述半胱天冬酶抑制剂在得到的混合物中的浓度为至少0.01μM、至少0.1μM、至少0.25μM、至少0.5μM、至少0.6μM、至少0.7μM、至少0.8μM、至少0.9μM或至少1μM,以及其中优选地,得到的混合物包含的半胱天冬酶抑制剂的浓度在以下范围内:0.01μM至100μM、0.1μM至75μM、0.25μM至50μM、0.5μM至40μM、0.6μM至30μM、0.7μM至35μM、0.8μM至30μM、0.9μM至25μM、1μM至20μM、1.1μM至17.5μM、1.25μM至15μM或1.5μM至12.5μM。
5.权利要求1至4的一项或多项的收集容器,其包含:
a)丁酰胺;
b)至少一种泛半胱天冬酶抑制剂;
c)任选地,至少一种式1的化合物,优选为N,N-二烷基-羧酸酰胺,更优选为N,N-二烷基丙酰胺;以及
d)任选地,抗凝剂,优选为螯合剂,更优选为EDTA。
6.权利要求5的收集容器,其中所述泛半胱天冬酶抑制剂选自Q-VD-OPh和Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK,并且更优选为Q-VD-OPh。
7.权利要求1至6的一项或多项的收集容器,其中所述容器还包含:
c)式1的化合物。
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